根据《中国药典》2020版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制，用于生产抗体类药物、蛋白类药物、细胞治疗产品等生物制品的细胞系/株，需通过全面的细胞检定，并经国家药品监督管理部门批准。义翘神州细胞库检测实验室为生物安全二级实验室，已在北京市备案，且通过CNAS认证。该实验室按照GMP和GLP质量体系运行，B+A环境，满足无菌检测、分枝杆菌检测环境要求。

义翘神州拥有经验丰富的检测团队，可全程提供技术指导，并在项目开展之前提供相关咨询。依据药典方法及ICH、FDA及其它监管法规，义翘神州可根据客户的不同申报需求，提供细胞库检定方案，以更好地帮助客户完成中外申报，满足出海需求。出具的检测报告获得监管部门认可，已助力多家公司完成IND和BLA申报。

细胞库的建立

细胞库的建立可为生物制品的生产提供检定合格、质量相同、能持续稳定传代的细胞。 

各级细胞库的概念

• PCB：由一个原始细胞群体发展成为传代稳定的细胞群体，或经过克隆培养形成的均一细胞群体，通过检定证明适用于生物制品生产或检定。在特定条件下，将一定数量、成分均一的细胞悬液，定量均匀分装于细胞冻存管，于液氮冻存，即为细胞种子，供建立主细胞库用。 

• WCB：工作细胞库的细胞由MCB传代扩增制成。生产企业的工作细胞库必须限定为一个细胞代次。冻存时细胞的传代水平须确保细胞复苏后传代增殖的细胞数量能满足生产一批或一个亚批制品。复苏后的传代的水平应不超过批准的该细胞用于生产的限定。所制备的WCB必须经检定合格后，方可用于生产。 

• MCB：取细胞种子经细胞传代、增殖后均匀混合成一批，定量均匀分装于细胞冻存管，保存于液氮。经全面检定合格后，即可作为主细胞库，用于工作细胞库的制备。生产企业的主细胞库最多不得超过两个细胞代次。 

• EOPC&UPB：生产终末细胞是指在或超过生产末期时收获的细胞，尽可能取按生产规模制备的生产末期细胞。EOPC应进行一次全面检定，当生产工艺发生改变时，应重新对EOPC进行检测。收获液UPB包含生产用细胞和细胞培养上清液。 

细胞库检定的必要性

生物制品的安全性：造成生物制品的污染，直接影响产品的安全性； 污染后给企业带来巨大的经济损失。 

国内外法规要求：中国、美国、欧洲等药典明确规定必须对细胞库进行充分检定后才可用于生物制品的生产； CDE审查必查项目。 

细胞库检定阶段

原则上各级细胞库建好库后要及时进行检定，确保细胞库没有污染后，才能用于下级细胞库的建立或产品的生产。  细胞库建立后应至少对MCB细胞及生产终末细胞（EOPC）进行一次全面检定。当生产工艺发生改变时，应重新对EOPC进行检定。每次从MCB建立一个新的WCB，均应按规定项目进行检定。 IND或BLA阶段对细胞库的检定要求是相同的，但需满足现行药典法规的要求。

双C认证细胞库检测服务  

○ 经验丰富，方法成熟                 ○ 检测快，通量高，周期短                ○ 支持中外双报，满足出海需求

双C认证细胞库检测服务技术平台

苏州细胞库检测中心

苏州细胞库检测中心是一个专门提供细胞库检定服务的检测中心，占地面积广，通量大，可以解决更多客户需求。同时实验室严格遵循GLP和GMP规范进行管理。
• 体系认证：CMA认证、CNAS (申请中)
• 管理：GMP、GLP、CNAS
• 实验室：生物二级+负压条件

北京细胞库检测中心

拥有专业的细胞库检测技术人员，实践经验丰富，可根据不同生物制品类别和国内外（如NMPA、FDA、ICH、EMA等）不同的申报要求，制定规范科学和经验证的细胞库检定方案。
• 体系认证：CNAS认证
• 管理：GMP、GLP、CNAS
• 实验室：生物二级+负压条件

实验室和仪器设备

实验室按照GLP和GMP质量体系运行，B+A环境，符合无菌检测、分枝杆菌检测环境要求。并通过生物安全二级实验室备案，保证生物安全。配套共聚焦显微镜、透射电镜、荧光定量PCR仪等仪器设备。

细胞库检测服务范围

义翘神州可提供主细胞库（MCB）、工作细胞库（WCB）、收获液 (UPB)、生产终末细胞（EOPC）的细胞库检定服务，已成功检测多个CHO、293、间充质干细胞等细胞库项目。细胞库检测方法成熟，符合药典等法规的要求，且经过严格的方法学验证。

细胞库检测服务内容

义翘神州遵循NMPA、FDA、EMA、ICH等多个国内外法规和指导原则，建立了全面的细胞库检定方法，主要包括以下几个方面：细胞鉴别、无菌检查、支原体检查、内外源病毒污染检查、成瘤性检查等，义翘神州提供的检测项目和方法描述见下表：

备注："+" 为必检项目，"-" 为非强制检定项目。(+) 表示需要根据细胞特性、传代历史、培养过程等情况要求的检定项目。

细胞库检定方法

• 细菌、真菌检查
  无菌检查
  按照2020版《中国药典》三部通则1101无菌检查法的要求进行，义翘神州可提供薄膜过滤法和直接接种法。无菌检查在B+A环境中进行，并且在检测过程中对环境进行持续监测。下图是采用薄膜过滤法的案例。

• 支原体检查——培养法
  按照2020版《中国药典》中生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制及通则3301支原体检查法的要求进行，义翘神州提供符合法规要求的支原体检查（培养法）。培养法检测的灵敏度高于中国药典要求，肺炎支原体达到10-9，口腔支原体达到10-5。

• 支原体检查——DNA染色法
  按照2020版《中国药典》中生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制及通则3301支原体检查法的要求进行，义翘神州提供符合法规要求的指示细胞培养法（DNA 染色法）。如果样品被支原体污染，在荧光显微镜下除细胞外，可见大小不等、不规则的荧光着色颗粒。

• 内外源病毒污染检查——体外不同指示细胞接种培养
  按照2020版《中国药典》中生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制的要求进行，根据样品需求提供周期为14或28天（人或猴巨细胞病毒，CMV）的检测。将供试品接种至3种指示细胞（Vero、MRC-5、同种属同组织类型来源细胞），连续培养14天或28天，观察细胞病变，并采用血吸附和血凝集检测是否存在任何病毒污染。

• 内外源病毒污染检查——牛源病毒检查
  按照2020版《中国药典》中生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制及通则3604新生牛血清检测要求的要求进行。通过接种指示细胞培养21天，分别进行细胞病变观察（CPE）、血吸附检查（HAd）及荧光抗体检测（IF）。牛源性病毒检查按照中国药典要求，提供完整的阳性对照和阴性对照。

• 内外源病毒污染检查——猪源病毒检查
  按照2020版《中国药典》中生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制的要求进行，通过接种指示细胞PK-15培养21天后进行细胞病变观察（CPE）、血吸附检查（HAd）。

• 内外源病毒污染检查——动物和鸡胚体内接种法
  按照2020版《中国药典》中生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制及通则3302外源病毒因子检查法的要求进行，义翘神州提供乳鼠脑内及腹腔接种法、小鼠脑内及腹腔接种法、豚鼠腹腔接种法、家兔皮内及皮下接种法、鸡胚接种法。