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决明子色谱柱
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色谱柱类:美国热电ThermoFisher,、安捷伦(Agilent)、美国WATERS、瑞典Kromasil 、日本Cosmosil 、大赛璐(Daicel)、日本YMC 、日本TOSOH,日本三菱化学(MITSUBISHI CHEMICAL)、等。
标准品类:美国药典USP,欧洲药典EP, 英国LGC, 日本药典JP, 加拿大TRC,中检所
分离纯化填料:GE公司、富士填料(FUJI)、大曹填料(DAISO GEL),YMC公司填料,加拿大silicycle, 三菱化学树脂(MITSUBISHI CHEMICAL),罗门哈斯树脂(Amberlite)、国产树脂。
小型仪器:柱温箱、萃取仪、旋转蒸发仪、移液器。
德国徕卡Leica一次性刀片、冷冻包埋剂、切片石蜡、钢刀、盖玻片、防卷板、包埋模具、封片胶等病理耗材试剂
使用POSITISIL® ODS-1 5um 4.6X250mm色谱柱,参照《中国药典》高效液相色谱法对决明子提取物进行含量测定,检测大黄酚、橙黄决明素,可满足实验要求。
对照品溶液的制备取大黄酚对照品、橙黄决明素对照品适量,精密称定,加无水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液制成每1ml含大黄酚30μg、橙黄决明素20μg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,称定重量,加热回流2小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液25ml,蒸干,加稀/盐酸30ml,置水浴中加热水解1小时,立即冷却,用三氯jia烷振摇提取4次,每次30ml,合并三氯jia烷液,回收溶剂至干,残渣用无水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液使溶解,转移至25ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
色谱条件
色谱柱:POSITISIL® ODS-1 5um 4.6X250mm
流动相:A 乙腈 B 0.1%磷酸溶液
B conc. 60%(0-15min)
60→10%(15-30min)
0%(30-40min)
流 速:1 mL/min
柱 温:25 ℃
波 长:UV 284nm
进样量:10μL
理论板数按橙黄决明素峰计算应不低于3000。