钙离子探针

Ca2+作为细胞内的第二信使，调控着许多重要的生理活动。在与Ca2+结合条件下，荧光探针显现出光谱响应；这使研究者可以通过利用荧光显微镜、流式细胞仪、荧光分光镜和荧光分光仪等来研究细胞内部游离的Ca2+浓度的变化。而Fluo-3结合钙离子后的吸收波长为506nm，发射波长为526nm（绿色）。因为常被用488型激光发生器激发，激发波的长波长降低了背景的干扰，因此是使用广泛的荧光探针之一。

Fluo-3的保存和溶解：

1）收到货后，应置于-20℃保存。

2）推荐用DMSO溶解探针，溶解前应将DMSO 和Fluo3均在室温平衡。溶解过程较慢，请保持足够的溶解时间。如果要长期保存，请用无水DMSO溶解，溶解后的储液密封置于-20℃保存。同样储液在每次开盖前都要置于室温平衡，以避免水汽凝结在长期保存中，造成探针水解。一般推荐的储液浓度为1-5mM，工作液浓度一般为：1-5 µM。为了防止出现较高背景及非特异性染色，探针的终浓度要尽可能低。

3）公司在每次发货时，都给客户提供免费的F-127助溶剂，用于探针溶解。如果用纯的DMSO长时间溶解不了，请配制20%的F127 DMSO溶液，加速溶解。

Fluo-3和Fura-2的区别：

Fluo-3和Fura-2相比，其优点是：一方面可以被氩离子激光（argon-ion laser）的488nm激发光激发，便于检测；另一方面，Fluo-3和钙离子结合后荧光变化更强，即对钙离子浓度变化的检测更加灵敏；同时，Fluo-3和钙离子的结合能力较弱，这样可以比Fura-2检测到细胞内更高浓度的钙离子水平；此外，对于细胞内的钙离子的即时变化反应得更加准确，减小了因为和钙离子解离速度慢而导致的荧光变化滞后。Fluo-3广泛地用于流式细胞术和激光共聚焦显微扫描中。

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