背景简介：

ELISA实验广泛应用于抗体检测，这些实验中没有考虑样本中蛋白与酶标板表面结合引起的假阳性。在这些非特性反应中，检测抗体的空白值被所有客户考虑到，但是样本本身的空白值常被客户忽略。背景反应完全依赖于样本本身。如果不考虑样本的背景反应，背景反应值也会计入读数，出现很多不确定的结果。因此必须考虑到ELISA实验中各种假阳性以得到真实的数据。

图1释：对于抗原包被的试剂盒，低稀释比的血清，其背景值会很高，会超出抗原-抗体反应。通过设置无抗原包被孔 （None），很容易测定背景效应。

注：降低试剂盒灵敏度并不能降低低背景反应。

Chondrex公司研制的ELISA封闭液（ChonBlock™），能够有效阻止抗体检测试剂盒中的非特异性反应，不影响试剂盒本身的抗原抗体反应。该封闭液被广泛用于抗体检测试剂盒，例如：人或动物血清致病因子，疫苗及自身免疫疾病研究检测等。

图2释：关节炎病人血清样本（1/10~1/640）用不同的封闭液稀释稀释，加入检测板，用抗人IgG-HRP标记抗体检测结果对比，结果显示ChonBlock™能够有效封闭背景效应，而其他缓冲液系统都达不到以上效果。

图3释：13例正常人血清样本和13例关节炎血清样本1/500用以下稀释液稀释稀释。a)RIA-10% NGS  b）ChonBlock™封闭液，加入到Glycine对照多肽，CCP（cyclic citrullinated peptide）孔。CCP孔真实的OD值检测值：减去背景OD值（Glycine对照孔）。

注：RIA-10% NGS缓冲液系统，由于背景效应太高，测不到抗CCP抗体。

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参考文献

1. Terato et al. Preventing intense false positive and negative reactions attributed to the principle of ELISA to reinvestigate antibody studies in autoimmune diseases. J. Immunol. Methods 407, 15-25 (2014).