Listlabs Pertussis Toxin  百日咳毒素

（Cat#179A Pertussis Toxin,PTX）

主要应用：

PTX常与MOG（35-55），PLP（139-151），PLP（178-191）等免疫肽联合注射动物，从而建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE）模型，即用来研究多发性硬化症（Mutiple sclerosis，MS）的常用动物模型。

基本介绍：

百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX）是一种由6个非共价连接亚基组成的多元件蛋白，分子量范围约为9-28kDa，这些亚基分别命名为S1，S2，S3，S4和S5，天然百日咳毒素中所占比为1:1:1:2:1，其中S4亚基以2倍形式存在。最大亚基为S1（也称为A启动子），包含NAD+糖基水解酶和ADP-核糖基转移酶活性。单独的A启动子能够将NAD+的ADP核糖转移到Gαi，Gαo或Gαt家族G蛋白的α亚基。PTX的结晶结构显示其呈金字塔形状，A启动子位于塔尖，中间是S5，最底端是二个二聚体，分别是S2-S4,和S3-S4。这5个亚基统称为B寡聚体亚基（S2，S3，S4，S4和S5），允许PTX进入大部分细胞，使其粘附在包括TLR4和糖蛋白Ib在内受体蛋白的多糖残基上。通过受体介导的内吞作用进入细胞后，PTX通过胞内体途径和高尔基体复合物逆向转运进入内质网。A启动子从PTX上释放出来，穿透内质网膜并导致目标膜偶联的G蛋白失活。

生理功能：

百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX）由Bordetella pertussis代谢纯化所得，一种多亚基毒素，与大多数哺乳动物培养细胞结合并特定靶向G蛋白，抑制G蛋白及其在信号通路中的生理功能。PTX的生理效应因G蛋白功能不同而变化。正是依赖Gi家族的蛋白偶联受体来抑制信号通路的能力，PTX是细胞生物学研究中的一种重要工具。PTX通过抑制和调节各种宿主对Bordetella pertussis的免疫反应在传染方面发挥重要作用。鼠类动物模型中PTX还能用来刺激建立实验性自身免疫疾病，比如实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE）模型。

产品信息

List labs提供三种配方形式的百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX），分别是甘油溶液（货号：179），溶于缓冲液的冻干粉（货号：180），以及溶于纯水的冻干粉（货号：181）。

组成：

每瓶含50ug的百日咳毒素，用：500ul水重悬后为：含50ug百日咳毒素的0.01mol/L的磷酸钠，0.05mol/L氯化钠，pH7.0的缓冲液。使用前请轻轻混匀，保证溶解为均质状态。请不要无菌过滤，这样会导致原料损失。温和操作，不要涡旋混匀。

产品浓度：

用牛血清白蛋白作为标准品，Bradford 方法测定蛋白浓度。

纯度：

16% SDS-PAGE电泳，有5条单独条带，与Tamura 等报道的一致，纯度＞95%。

产品经内毒素检测，在可接受范围。

实验：

CHO细胞实验：参照Hewlett等报道的方法，能够引起阳性反应的毒素浓度为：0.1ng/m（以具体批次为准）l。注意：毒性可能因批次不同而不同。每个实验室应根据具体的实验，优化最佳的使用剂量。

腺苷酸环化酶测定实验：参照Wolff 报道的方法，Adenylate Cyclase 活性（以具体批次为准）,出现1umol的钙调蛋白，是1.6pmol CAMP/min/ug 毒素。

保存：

冻干粉形式和重悬后均2-8℃保存，不要冻。

活化：

本产品非活化形式，如果需要活化形式，请参照文献（Kaslow et al）实验条件。

防护：

操作时，请穿上实验服，带上手套和防护眼镜。此产品仅供科研应用，不可用于诊断试剂。对因不当操作引起的伤害，公司不负责。