屋尘螨过敏原

背景简介：

支气管哮喘（bronchial asthma，简称哮喘）是一种以嗜酸性粒细胞、肥大细胞反应为主的气道变应性炎症和气道反应性为特征的疾病。由于哮喘的发病机制复杂，病因与发病机理尚不明了，临床实验受伦理及方法限制，因此需要通过构建哮喘动物模型来研究疾病发生发展以及制定相应治疗措施。尘螨是最常见的空气过敏原，全球85%的哮喘患者对尘螨过敏。屋尘螨是一种免疫复合物，能够激活先天免疫和后天免疫应答。研究表明，HDM中的蛋白酶，如胰蛋白酶样酶，催过敏有促进作用，从而导致过敏几天对尘螨的过敏反应。
利用尘螨诱发动物建立哮喘模型，方法简便，操作性强，且成功率高。

美国Greer 公司专注于过敏原检测，提供各种动物、植物及食品、真菌等各种过敏原提取物。尘螨过敏原提取物，广泛应用于哮喘模型的制备。

产品信息：

英文名称：D.pteronyssinus ( House dust mite, HDM)

中文名称：屋尘螨

货号：XPB82D3A2.5  XPB82D3A25  XPB91D3A2.5  XPB91D3A25    XPB81D3A2.5  XPB81D3A25

规格：2.5ml/25ml

产品应用：

1.该产品为冻干粉,一般推荐客户参照COA中的蛋白浓度做稀释，客户收到货后用去离子水或蒸馏水稀释至相应工作浓度或储液浓度。比如：2.5ml包装的，加入2.5ml水，因为每个批次的蛋白含量有差异，可根据质检报告，计算终浓度。客户也可依据自身实验要求，稀释到任意浓度。

2.过敏原稀释后，如果一次用不完，推荐分装后-20℃保存（可分装成使用浓度后保存）。可冻融一次，解冻后，在一周内用完。

3.冻干粉过敏原效期为10年。

4.常见的两个比较相似的产品：B82 和B84，B82 和B84，均只代表D.pteronyssinus，不是实际订货货号，D.pteronyssinus产品分粗制品和冻干粉，实货都是冻干粉。冻干粉是粗品进一步纯化后的产品。B82和B84在粗品阶段，只在纯度上有细微差别,货号分别为：RMB82M 和RMB84M。冻干粉的D.pteronyssinus只有XPB82D3A2.5这一个货号（是由粗品RMB82M纯化后获得。）

参数说明：

收到货后，会有随货的质检报告（COA）。尘螨过敏原会有4个参数说明，其他类过敏原，如食物、花粉类等过敏原只有2个参数（干重和蛋白含量）说明。

以XPB82D3A2.5(Lot#385930)为例，参数说明：

1）纯过敏原（Der P1）： 是指纯过敏原Der P1 的含量（当然这个提取物的组分不只是只有Der P1,也有其他形式的，这个是主要的过敏原成分）。154.17mcg/vial 表示 Der P1 的含量是：154.17ug/瓶，mcg, microgram 微克的缩写。

2）干重（Dry Weight）: 干重16.7mg,  是去除水分后，瓶子里粉末的含量。

3）总蛋白（Protein） ：蛋白含量4.43mg， 是指：过敏原提取物的总蛋白含量。

4）内毒素含量（Endotoxin）：内毒素水平。尘螨有一款低内毒含量（做过内毒素处理），货号为：XPB91D3A2.5/ XPB91D3A25（之前XPB70D3A2.5/ XPB70D3A25已停产），要比未做过内毒素处理的XPB82D3A2.5/ XPB82D3A25内毒素含量相对低很多（并不是不含内毒素）。

低内毒素的一般用于做细胞实验，但由于冻干过程中无法保证无菌，如果做细胞实验，请做过滤除菌（0.22 um ）。

注意：

1）尘螨是提取物，提取物是混合物，不是纯蛋白。由于工艺和每批过敏原原料差异，因此每个批次含量（参数）都不同。如果对含量有要求，特别是之前用过别的批次的，没法保证和之前批次一致，请核对收到货的COA，确认符合您的要求再开瓶。

2）过敏原提取物是混合物，不能作为标准品，如ELISA实验中的标准品。

3）参考文献中用过Greer 产品的，都没有指出具体的是参照哪个参数？而且不同文献用量差别也很大，因此没有标准的方案推荐。客户需要根据自己的实验摸索最佳的实验条件。

如果以纯过敏原（Der P1）的含量为基准，成本太高。

如果以：干重（Dry Weight）的含量为基准，实际其中的过敏原的比例太低，不足以致敏。

根据客户实际使用经验，客户验证过参照Protein 含量做是可以的，因此我们一般推荐客户以“蛋白含量 Protein”为基准，具体实验条件客户需要自己摸索。

关于稀释、保存:

1) 过敏原提取物均为干粉包装，不是液体包装。规格里的2.5ml 或25ml 指的是瓶装规格。

客户可以根据实际工作浓度，用蒸馏水稀释到储液浓度，比如：蛋白含量是：4.43mg，用：2.5ml 蒸馏水稀释后，浓度就是：4.43mg/2.5ml=1.772mg/ml。

2) 尘螨干粉效期是10年，干粉室温或4℃保存。稀释后分装-20℃冻存（保证浓度在：0.1mg/ml以上），效期1年。

注意事项：

1.  蛋白含量不是重量， 不要用天平去称量，这个蛋白含量的测定COA里有说明，是Bradford法测定的，请不要用天平去称量。如果用天平去称量了，会导致无法定量，请不要做此操作。例如：您要用50ug 的量，那您可以根据您稀释后的浓度（比如：1.772mg/ml），可以根据这个算出您取多少体积的量就可以了。这样是可以准确定量的。

2.  玻璃瓶易碎，请不要置于-80℃保存。

D.pteronyssinus 屋尘螨过敏原

产品引用文献：

1. D Canbaz.Immunotoxicity of organophosphate flame retardants TPHP and TDCIPP on murine dendritic cells in vitro

2.L Utsch.Allergic sensitization is associated with inadequate antioxidant responses in mice and men.

3.DD Le.Allergic airway inflammation induces the migration of dendritic cells into airway sensory ganglia

4.SJ Tavernier.Opposing regulation and roles for PHD3 in lung dendritic cells and alveolar macrophages

5.John S. House.Genetic variation in HTR4 and lung function: GWAS follow-up in mouse.

6.KK Penberthy.Ex vivo modulation of the Foxo1 phosphorylation state does not lead to dysfunction of T regulatory cells.

7.W Huang.Beyond type 1 regulatory T cells: co-expression of LAG3 and CD49b in IL-10-producing T cell lineages.

8.Matthew T.Mechanism for initiation of food allergy: Dependence on skin barrier mutations and environmental allergen costimulation

9.LO Cruz.Excessive miR-27 expression impairs regulatory T cell-mediated immunological tolerance.

10.T. H. Acciani.Epidermal growth factor receptor signalling regulates granulocyte–macrophage colony‐stimulating factor production by airway epithelial cells and established allergic airway disease.

11.MY Tjota.Signaling through FcRγ-associated receptors on dendritic cells drives IL-33–dependent TH2-type responses.

12.TH Acciani.Diesel exhaust particle exposure increases severity of allergic asthma in young mice.

13.Zhimei Yang.Roles of Bronchopulmonary C-fibers in airway Hyperresponsiveness and airway remodeling induced by house dust mite.

14.MY Tjota.Activation of antigen presenting cells through FcRγ drivesIL-33 dependent Th2-type responses in the lungs.

15.SS Folmsbee.The cardiomyocyte protein αT-catenin contributes to asthma through regulating pulmonary vein inflammation.