德国徕卡 共聚焦显微镜 STELLARIS  FALCON FLIM 荧光寿命成像显微镜

清晰的对比，即时产生寿命成像

德国徕卡 共聚焦显微镜 STELLARIS  FALCON FLIM 荧光寿命成像显微镜（FAst Lifetime CONtrast，快速寿命对比）是功能成像的未来发展方向。 利用荧光寿命成像的强大性能来研究细胞生理学并探索活细胞动力学。 STELLARIS FALCON 是一款整合的荧光寿命成像 (FLIM) 解决方案，以视频速率进行荧光寿命成像来研究活细胞的快速动力学。

STELLARIS  FALCON 为您的成像增加了一个新的对比维度，实现生物传感以及跟踪蛋白质之间的相互作用。 现在，荧光寿命成像信息可用于STELLARIS 系统的所有模块。

您现在可以：

通过 FLIM-FRET（荧光共振能量转移）跟踪分子间的快速相互作用。

使用生物传感器检测代谢状态和微环境的变化

通过寿命对比区分多个荧光团

经过简单的培训即可获得荧光寿命成像数据

猫眼组织切片。 同时进行的光谱（灰色）和 FLIM（彩色）共聚焦成像显示了寿命对比情况。 使用 STELLARIS FALCON 和 LAS X 软件采集和显示。

通过 FLIM-FRET 跟踪分子间相互作用

现代科研工作研究分子间如何进行相互作用来完成重要任务。 FLIM-FRET 是探索这种相互作用的金标准。

STELLARIS FALCON 为 FLIM 仪器设定了新的速度标准。

它能在高度动态的细胞事件中完成荧光共振能量转移 (FRET)实验。 您可以在日常实验中采集和分析 FRET 数据。

HeLa 细胞中的笼锁cAMP，表达 EPAC mT2-dVenus FRET 传感器。 EPAC对紫外线介导的cAMP解笼锁的反应（中心区域）。 视频采集速度4帧/秒。 图像大小： 256 x256 像素。 颜色条的尺度（寿命）：ns。 由荷兰阿姆斯特丹癌症研究所的Kees Jalink和Bram van den Broek提供。

用生物传感器监测细微而快速的变化

生物传感器是代谢活动、信号传导机制、酸碱度和微环境变化的强大报告元件。

STELLARIS  FALCON 可提供荧光寿命中包含的信息，即使在膜电位动力学这类高速事件中也不例外。 这些信息是 STELLARIS 系统提供的光谱荧光强度成像和TauSense模式的有力补充。

用活化肽刺激后的钙振荡。 单个细胞中的响应被记录为寿命变化。 视频以4 pfs速率拍摄。 图像大小： 256 x 256个像素。 颜色条的尺度（寿命）：ns。 由荷兰阿姆斯特丹癌症研究所的Kees Jalink和Bram van den Broek提供。

更可靠、更灵敏的代谢成像

自发荧光 在传统成像中可能是一个问题。 STELLARIS 8 FALCON 可将其转化为有价值的信息。 您现在可以将自发荧光转化为代谢状态、细胞分化和癌症发展的报告元件。

此外，STELLARIS FALCON 能够对活组织进行成像对比，而荧光标记通常是非特异性的，或者会破坏生理条件。

非生理条件下哺乳动物细胞的自发荧光 （酸碱度为 8.5）。 信号与内源性 NAD/NADH 的变化相关。 氧化应激的发展表现为荧光寿命随时间缩短。 原始图像大小： 512 x 512 像素。 颜色条的尺度（寿命）：ns。

超越光谱选项的荧光基团分离

荧光标记是区分细胞内结构的标准方法。 光谱分离方法非常强大，但有时当发射光谱太接近时，这个方法就会受到限制。

使用 STELLARIS  FALCON，您可以充分利用荧光寿命成像的潜力，使用指数拟合、谱图拟合和新的 FLIM 相量分离分析功能来分离多个荧光探针。

交互式图像： 通过寿命对比加以区分的细胞骨架结构。 波形蛋白用Alexa Fluor 555（绿色）免疫标记，微管蛋白用Alexa Fluor 546（蓝色）免疫标记。 荧光基团的光谱非常相似，但它们可通过荧光寿命信息区分。 图像大小： 512 x 512 像素。

强度FLIM

使用 STELLARIS FALCON 进行快速寿命成像

STELLARIS FALCON 显微镜克服了FLIM的速度限制，可快速提供寿命数据。

到目前为止，由于FLIM的技术限制，从快速过程的荧光寿命数据中获取功能信息仍有很大难度。 FLIM采集速度比记录共聚焦强度至少慢10倍。

使用 STELLARIS FALCON 快速荧光寿命对比成像， 您能够以适当的速度跟踪细胞的动态过程。 这是因为采用了一种新的时间测量方法，即采用 TCSPC（时间相关单光子计数）技术和智能的数据处理和分析算法。

《自然》网站上的应用指南： SP8 FALCON：荧光寿命成像的新概念，实现视频速率的共聚焦荧光寿命成像

含有Alexa Fluor 555（绿色）溶液中的荧光珠（品红色）单通道图像。 基于荧光寿命的荧光基团分离可以在不同的速度下进行，例如 16帧/秒（上）、27帧/秒（视频速率，中）和 83帧/秒（超快，下）。 通过寿命信息进行染料分离明显比强度信息（灰度）更有优势。 视频展示了寿命组分的逐像素拟合。 帧大小： 512 x 64 像素。 比例尺： 10微米。

一体化的多模态成像

STELLARIS  FALCON 使 FLIM 与其他模态的结合变得十分简单。 一直以来，研究人员都不得不处理复杂的布线和繁琐的文件传输工作。 使用 STELLARIS  FALCON，您可以将寿命信息整合到标准的共聚焦工作流程中。

STELLARIS  FALCON 可

整合到 LAS X 采集与分析软件中。 它既可以同时记录4个光谱通道，又可先后记录多达10个通道的荧光寿命成像。 使用 STELLARIS FALCON，您能够在 3D 层扫、延时序列乃至大型拼接成像方式中获得荧光寿命信息。

使用  LAS X NAVIGATOR，您可以将观察区域扩大10,000 倍，更快地识别感兴趣的区域，以全新的方式研究样本。

轻松采集复杂样本。 高分辨率小鼠胚胎成像，由包含1.9亿像素的722张图像拼接而成。 通过四个

荧光寿命拟合的FLIM数据，彩色编码。 采集时间： 1小时23分。 分析时间： 1小时

通过相量简单确定寿命

使用 STELLARIS 8FALCON 的 FLIM 相量图进行分析，可显示寿命分量的 2D 图。 通过 FLIM 相量分析，您可以跟踪微环境变化，选择多路信号的组分来确定 FRET 效率。

Alexa555-鬼笔环肽和 H2B-mCherry 标记的细胞。 使用 FLIM phasors 执行组分离。 相量图清晰地显示了两种寿命分布。 样本提供方： 德国康斯坦茨大学生物系 Martin Stöckl 博士。

只需点击一下即可获得您需要的结果

使用 LAS X 软件，只需点击一下即可获得荧光寿命成像，方法与常规光谱成像相同。

即使您将显微镜当作一种辅助技术，您也可以找到重要的内容，并立即开始成像。

更专业的功能可作为工作流程提供，为您实现方便的自动化工作。

一键式设计，让您能够专注于科学研究： 由 LAS X 软件控制的 STELLARIS  FALCON