德国徕卡 共聚焦显微镜 STELLARIS DIVE 光谱式多光子显微镜

多色多光子显微镜让您更接近真像

多个不同荧光标记的组合越来越多地用于研究细胞和分子之间的动态相互作用和空间关系。 目的是理解各种各样复杂的生物事件，例如细胞连通性、细胞表型检测、蛋白质 相互作用或者蛋白共表达和共定位。 要将这类研究扩大到整个器官或组织，需要合适的大体积多色显微镜学方法。 现在，DIVE 和 STELLARIS 相结合，为您提供灵活的多色多光子成像的强大性能。 而且，您还可以通过额外的无标记成像功能扩展实验的潜力。

德国徕卡 共聚焦显微镜 STELLARIS  DIVE 光谱式多光子显微镜可无缝集成到共聚焦软件界面中，提供快速且出色的导航功能 ，可轻松研究复杂样本中的动态过程。STELLARIS DIVE——为您的研究提供各种可能性。

强大的在体分析能力，较之前提供更多细节

STELLARIS  DIVE 可为您提供深度超过 1 毫米的灵活多色成像。 使用 4Tune 光谱可调非退扫描检测器，最多可同时定义四个检测波段，或者在发射光谱中的任何区域先后成像时获得无限数量的荧光团。 您可以根据所需的荧光团组合进行灵活调节。 使用 STELLARIS 8 DIVE ，您可以通过超过 10 亿个荧光团组合进行多光子实验，您能够更详细地研究复杂的过程，例如神经元连通性、器官结构、动态相互作用或者细胞和蛋白质的空间关系。

利用 STELLARIS  DIVE，您可以通过四种或更多颜色研究活体样本中的细胞转移、区分相关蛋白、观察清醒小鼠的海马体活动或者固定的厚肠切片的结构！

传统的二向色镜一直无法最佳区分所有荧光团，但是现在利用光谱探测器可以轻松地实现这一点，因为我们可以真正做到为每个荧光团优化您要探测的波长。

荷兰癌症研究所（荷兰阿姆斯特丹） Jacco van Rheenen 教授/博士。

活小鼠大脑皮层的神经元（GFP，绿色）和小胶质细胞（YFP，黄色）带有遗传标记，星形胶质细胞通过磺酰罗丹明（蓝色）标记，在尾静脉中注射 Alexa680-Dextran 将血管染色（红色）。 整体约 250 x 250 x 250 µm。 样本由德国神经退行性疾病研究中心光学显微镜设备部门（德国波恩）提供。

轻松使用 DIVE——4Tune 检测器

4Tune 非退扫描检测系统 可以配备 2 至 4 个检测器，并且可自由配置混合检测器 (Power HyD NDD)、光电倍增管 (PMT) 或将两者结合使用。 发射光通过可变二向色镜和带通滤波器的组合方法分离。 在整个可见光光谱（380 - 800 纳米）范围内自由调节您的检测范围！

使用 4Tune 用户界面，可以通过简单的拖放操作来优化多个转基因标志物的发射光设置。 用户界面设计清晰直观，操作非常简单，几乎无需培训。

使用 STELLARIS  DIVE，您能够为任何现有的和新开发的转基因标志物做好准备，而且可以适应未来的新发展！

上图： 4Tune 非退扫描检测系统： 1) 可变二向色镜 (VD)。 2) 可变带通 (VB)。 3) Power HyD NDD 或 PMT。 下图： 直观的 4Tune 用户界面，可轻松设置 380 至 800 纳米的所有颜色的检测窗口。

深入探索新维度

使用 STELLARIS  DIVE，您能够灵活调节实现更深层更细微观察。 使用新型可变光路扩束镜 (VBE)，您可针对任何物镜对所有激发光束进行独立优化调节。

VBE 能够根据您的研究问题优化共定位，并实现分辨率和深度之间的良好平衡。

小鼠大脑皮层，Thy1-eYFP。 使用“深度优先”设置将穿透深度增加 20%。 IRAPO 25x1.0 W motCorr. 样本由德国神经退行性疾病研究中心光学显微镜设备部门（德国波恩）Kevin Keppler 提供。

使用可变光路扩束镜优化深度和分辨率

徕卡可变光路扩束镜 (VBE) 将可调光束直径与可调发散度相结合。 为您提供可调深度、分辨率和全色校正。

可调光束直径可实现分辨率与深度之间的平衡优化

STELLARIS DIVE 能够根据您的样本要求进行调节。 使用可变扩束镜，您可以选择： 优化分辨率——光束充满物镜后孔径，以及优化穿透深度——光束直径稍稍小于物镜后孔径。 后孔径未充满会使焦点体积增大、光程缩短，从而增大有效激发。

可调光束发散可实现全色校正

我们的 IR APO 物镜在红外波段上不会出现色差。 配备 STELLARIS 8 DIVE，您就可以使用适合红外线以及多条红外激光线的物镜： 可变光路扩束镜可用于校正色差，完成更实用的多色实验。

可调式可变光路扩束镜 (VBE)

通过无标记成像功能扩展体内深度实验的潜力

胶原蛋白和弹性蛋白等分子在癌症等疾病中起到相关作用。 我们的 4 tune 检测器可使用二次和三次谐波产生信号，无需染色即可研究这些重要结构。

DIVE 与 STELLARIS 相结合，还可使用荧光固有的寿命信息。 借助这种能力，您可以通过 NADH 或 FAD 的寿命成像进行实验，例如进行样本代谢绘图。

五彩斑斓的小鼠小肠：胶原蛋白 1 显示为灰色（无标记 SHG），谱系追踪干细胞显示为青色、绿色、黄色和红色。干细胞在生物体内癌症的传播中发挥着重要作用。样品由荷兰癌症研究所的 Jacco van Rheenen 提供。

轻松在组织中导航，无需额外染色

在组织中导航通常需要使用导向标志来了解感兴趣区域的位置。 胶原蛋白的支架特性有助于在组织中导航并找到感兴趣区域，且无需复染。

大多数生物组织含有胶原蛋白，它是结缔组织的主要成分。 例如，肠被一层胶原蛋白包裹。 通过精确采集 ½ 激发波长的发射信号，可以在多光子显微镜下轻松观察胶原蛋白。 通过 4Tune 灵活的检测窗口，可使用任何波长采集这类信号，无需额外的标记或工作。

一旦显微镜学家找到胶原蛋白结构，她就知道她感兴趣的组织（这里是肠道干细胞）在附近了。
五彩斑斓的小鼠小肠：来自 SHG，灰色表示胶原蛋白 1，青色、绿色、黄色和红色谱系示踪干细胞。样品由荷兰癌症研究所的 Jacco van Rheenen 提供。

将多光子成像和荧光寿命信息相结合，研究代谢变化

代谢变化可能是组织健康的重要标记。

STELLARIS  DIVE 可提供 TauSense 的所有优势，后者是一套基于荧光寿命的成像工具。 当细胞的代谢状态发生变化时，可通过 NADH 等分子的荧光寿命变化来显现出来。 NADH 在糖的新陈代谢中起到主要作用，其荧光寿命取决于葡萄糖浓度。 在引起葡萄糖分解的生物化学反应中会发生构象变化，这种变化会改变 NADH 荧光寿命。

STELLARIS  DIVE 可与 FAst Lifetime COntrast（FALCON）结合使用，进行全定量荧光寿命分析。

被培养的 HeLa 细胞用葡萄糖处理前后的 NADH 自体荧光。 左：使用 TauContrast 的定性结果。 右：使用 FALCON 中的相量图进行的定量分析。

为多光子实验增加额外维度

自发荧光是组织中内源性荧光团（例如 NADH 或 FAD 等小分子或组织结构）发射的自然荧光。 它在样本成像时经常会导致问题。 但是，如果您能发挥它的优势呢？

现在，将 DIVE 和 TauSense 相结合，可以通过寿命信息进行分离，从自发荧光信号中获得有价值的信息。 这一功能为您提供了一个额外的渠道，从而能够从宝贵的样本中获得更多信息。

使用 RapidClear 透明化处理的肾脏切片并使用多光子激发成像。第一个图像是强度图像，第二个是 TauContrast（850 nm 激发），第三个来自四个光谱通道，其中红色表示血管（AF488，920 nm 激发）、灰色表示胶原蛋白 (SHG)、绿色表示神经细胞（SytoxOrange，1040 nm 激发）和蓝色表示色核（AF633，1100 nm 激发）。由 SunJin 实验室提供。

STELLARIS 的软件功能提高工作效率

多光子系统通常使用严格，需要根据每个实验和用户进行调整。 此外还有使用活体动物或新移植组织工作的压力，您很快就会了解进行多光子实验时功能灵活性带来的优势。 STELLARIS 软件中无缝集成了多光子功能，STELLARIS 8 DIVE 可为您提供涵盖从实验设置到最终结果的轻松、无忧的工作流程。

使用 ImageCompass 顺利设置实验

使用 LAS X Navigator 在样本上找到感兴趣区域的直观方法

通过动态信号增强提高速度和分辨率

直径 3.5 mm 的肠道切片，用 RapidClear 透明化并用 Navigator 成像：黑白：SHG – 胶原蛋白；蓝色：Sytox Orange – 细胞核；绿色：Alexa 633 – 神经细胞；红色：Alexa 488 – 血管。由 SunJin 实验室提供。

使用 ImageCompass 轻松快速设置多色多光子成像实验

STELLARIS DIVE 多光子硬件集成到 STELLARIS 的 ImageCompass 界面中，您可以轻松定义实验设置，以便快速启动。

系统可利用范围广泛的荧光团数据库自动定义 MP 激发和发射。 您也可以点击几下鼠标进行手动定义。 按序设置以及快速预览和 3D 查看器——多色多光子成像从未如此简单。

ImageCompass 可以控制 STELLARIS 8 DIVE 的硬件，并允许轻松定义实验设置。

即时观察重要细节，同时始终进行样本概览

LAS X Navigator 是功能强大的导航工具，可让您从逐个图像的搜索方式快速转变为查看整个样本概况的模式。 DIVE 和 STELLARIS 相结合，使您的多光子实验效率更高。 获益于在大型复杂样本中自由导航的功能，通过快速概览、多位置成像和区块扫描获得深度多色成像。

轻松获得 1 厘米长、0.5 毫米厚的肾脏切片的拼图，并全面了解肾神经细胞和胶原蛋白系统（此处与 TauContrast 结合使用）。

使用 LAS X Navigator 和 TauContrast 成像的肾脏切片（SunJin Labs，用 RapidClear 透明化）。整个切片尺寸为 10 x 7 mm，厚度为 500 µm。蓝色的较短到达时间代表胶原蛋白（SHG 信号），而绿色的较长值代表用 Alexa 633 染色的神经细胞。

动态信号增强：

保持体内快速生命过程的分辨率

活体样本中的生命过程速度可能很快。 然而，动物模型中的荧光信号往往比较弱。

动态信号增强是应对这两种挑战的解决方案。 它可以使信号平均化，实现更佳信噪比，从而获得更高的分辨率，同时还可适应样本的动态变化。