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类胰岛素生长因子BP3ELISA试剂盒(酶联免疫吸附法)
ELISA操作试剂准备过程及问题解答
试剂盒和样本不平衡,直接打开后进行检测
浓缩试剂如洗涤液等未进行稀释,直接使用;
冻干试剂溶解不充分,解冻样本使用前不混匀;
标准品稀释不当,酶标试剂配制时间不当
解决办法:
1) 试剂盒使用前应整体取出,在室温下平衡30min后再进行测定;
2) 根据产品标签或说明书要求,对浓缩试剂采用适当的溶剂稀释,并按要求保存或使用;
3) 冻干试剂溶解后,要放置15min左右,使用前再次混匀;冻存样本溶解后,可轻轻振荡混匀,如有颗粒或沉淀,需离心后取上清备用。
4) 标准品如需稀释,按照说明书要求进行,稀释量至少多于加样量的20%。部分酶标试剂要求加样前现配现用,应按照要求配制,避免提前配制导致酶的失活。
通用名称:类胰岛素生长因子结合蛋白3测定试剂盒(酶联免疫吸附法)
英文名称:IGFBP-3 ELISA
公司品牌:德国DRG
产品货号:EIA5409
产品规格:96T
检测样本:血清
储存条件:2-8℃
检测方法:ELISA
预期用途:用于体外定量测定人血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-3的含量
供应商家:深圳市科润达生物工程有限公司
IGFBP-3 胰岛素样生长因子结合蛋白-3试剂盒产品规格
96T
类胰岛素生长因子BP3ELISA试剂盒预期用途
IGFBP-3 试剂盒用于体外定量测定人血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的含量。
IGFBP-3 前言简介
胰岛素样生长因子(IGF)系统是正常体内生长和再生的主要调节因子,影响细胞增殖,分化和细胞凋亡。 此外,IGF-系统似乎改变胰岛素敏感性和长期性葡萄糖代谢。 最后,许多流行病学,实验和临床资料表明,IGF-系统也涉及几种常见癌症的发展以及常见疾病如动脉粥样硬化和2型糖尿病等。
IGF家族由一系列密切相关的多肽组成,其包括两个主要促进生长的多肽,IGF-I和IGF-II,6种特异性高亲和力IGF结合蛋白(IGFBP-1至-6)和一个大的非IGF结合糖蛋白,“酸不稳定亚单位”(ALS)。
IGFBP-3是IGF结合蛋白,占健康人循环IGF结合能力的75%以上。 IGFBP-3与IGFBP-5共享功能特性,因为两种肽都能与ALS和IGF-I或-II的形成高分子量约150千道尔顿的三元复合物。 然而,IGFBP-5循环浓度比IGFBP-3低得多,而在健康受试者中,三元复合物携带多达90%的IGFBP-3但只有约50%的IGFBP-5。
IGFBP-3 胰岛素样生长因子结合蛋白-3试剂盒检测原理
GFBP3-ELISA是固相酶扩增敏感性对微孔板进行的免疫测定。标准品和样品与包被的捕获单克隆抗体(MAb 1)和用辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体(MAb 2)反应。经过孵育形成一个三明治结构:包被的MAb 1 - -人IGFBP3--MAb 2-HRP,洗涤微孔板以除去未结合的酶标记抗体。通过显色测量结合的酶标记抗体反应。加入显色溶液(TMB)并孵育。添加终止液终止反应,然后在适当波长下读取微孔板。被测物含量的显色程度与人IGFBP3浓度成正比。绘制标准曲线,样品中IGFBP3浓度通过标准曲线可直接读取。
IGFBP-3 试剂盒组成成分
成分 | 规格(96T) | 状态 | |
PLATE | 96孔微量滴定板,包被了IGFBP3(单克隆抗体) | 96孔 | 即用型 |
AbHRP CONC | 酶标记物浓缩液:HRP标记的抗IGFBP3(单抗),含procin和牛血清白蛋白的柠檬酸缓冲液 | 0.5ml*1瓶 | 用酶标记物缓冲液20倍稀释 |
CONJ BUF | 酶标记物缓冲液:含有牛血清白蛋白和百里酚的tris缓冲液 | 10ml*1瓶 | 即用型 |
CAL N | 标准品-N=1-5,含牛血清和百里酚的磷酸盐缓冲液。 瓶体标签上有具体浓度。 标准品都是预稀释过的,用稀释液做0标准品。 | 5瓶冻干粉 | 加入1ml蒸馏水 |
DIL BUF | 稀释液:含有牛血清,牛白蛋白和百里酚的磷酸盐缓冲液 | 100ml*1瓶 | 即用型 |
ConTROL N | 质控品N=1或2 ,含有人血清和百里酚,质控品是预稀释过的 | 2瓶冻干粉 | 加入1ml蒸馏水 |
WASH SOLN CONC | 洗涤液(tris-HCL) | 10ml*1瓶 | 蒸馏水200倍稀 释(使用电磁搅拌器) |
CHROM TMB | 底物液:TMB | 12ml*1瓶 | 即用型 |
STOP SOLN | 终止液:1.0N盐酸 | 12ml*1瓶 | 即用型 |
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