IBL/德国 品牌
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5羟色胺检测试剂盒RE59141
通用名称：5-羟色胺（5-HT）检测试剂盒（酶联免疫法）（超敏）
英文名称：(简写:5-HT)ELISA
产品货号：RE59141
产品规格：96T
产品品牌：德国IBL
试剂盒预期用途
5羟色胺检测试剂盒RE59141可用于低浓度及小体积样本中五羟色胺的定量检测。仅用于科研使用。
前言简介
五羟色胺是色氨酸代谢的中间产物，它主要存在于肠嗜铬细胞、血清素激活的神经元和血小板中，它已被确定为是中枢神经系统的一种神经递质。可以在肠粘膜的嗜铬细胞、血小板及脑血清素激活的神经元中发现高浓度的五羟色胺。中枢血清素的神经元可以影响生理功能，如睡眠和激素水平的调整。血清中五羟色胺水平的增高可见于恶性类癌、内源性抑郁症及精神分裂症。
5羟色胺试剂盒检测原理
将样品分别与酰化试剂一起温育后可以得到酰化的五羟色胺。此实验采用的是竞争性ELISA的原理，酰化的五羟色胺与抗血清竞争性结合到一定数量的抗体结合位点上。当反应系统达到平衡后，洗板除去未结合抗原及抗血清复合物。结合在固相上的抗体被抗兔的过氧化物酶检测到，在450nm处检测底物液与过氧化物酶的反应。结合到固相上的五羟色胺抗体的量与样品中五羟色胺的浓度成反比。
储存条件
5羟色胺试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃，避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。打开了的试剂盒在有效期内稳定，前提是要将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃下。
试剂盒组成成分
数量 | 标记 | 成分 |
| 1×12×8 | MTP | 包被板，可拆，微孔中包被五羟色胺 |
| 1×4ml | CAL CONC | 标准品浓缩型，浓度500ng/mL |
| 1×2×4ml | CONTROL 1+2 | 质控品1+2，浓缩型（500×）浓度及范围详见质控单。 |
| 1×4ml | ACYL BUF LOY | 酰化液，冻干粉 |
| 1×1ml | ACYL BUF LOY CONC | 酰化液，浓缩型，黄色。 |
| 4×2.5ml | ACYLREAG LYO | 酰化试剂，冻干粉 |
| 1×3ml | DEAC | 钝化剂，即用，蓝色 |
| 1×12ml | ENZCONJ | 酶联物，即用。 |
| 1×20ml | WASHBUF CONC | 洗涤液，25倍浓缩 |
| 1×12ml | TMB SUBS | 底物液，即用 |
| 1×12ml | TMB STOP | 终止液，即用，内含0.3M硫酸 |
| 2×6ml | SOLVENT | SOLVENT 溶剂。即用。 |
| 1×2ml | ASC ACID | 抗坏血酸即用。内含10%抗坏血酸 |
| 1×50ml | ASSAYBUF | 检测缓冲液使用前需加入抗坏血酸。内含10mM PBS （0.9% NaCl），稳定剂。 |
实验所需器材但试剂盒不提供
●移液器，体积：10;20;25;50;100;200μl
●用于标准品稀释的聚丙烯（PP）试管或聚丙烯（PP）微量试管
●试管架
●轨道摇床（500rpm）
●旋涡混合器
●带储器的8道移液器
●洗涤瓶，自动或半自动洗板机
●可在450nm处读数的酶标仪（参考波长：570-650nm）
●双蒸水或去离子水
●吸水纸、取样吸头和计时器
5-HT试剂盒检测步骤
| 1 | 将酰化的标准品、酰化的质控品和酰化的样品各50μl加入到相应的微孔中。 |
| 2 | 粘合铝箔覆盖微孔板，在2-8℃孵育15-10小时（过夜） |
| 3 | 移取粘合铝箔，弃去孵育液，每孔用250ul稀释的洗涤液洗涤微孔板4次，在纸巾上拍干除去残余液体。 |
| 4 | 在每一微孔中加入100μl酶联物。 |
| 5 | 盖板，室温（18-25℃）下摇床振荡（500rpm）温育60min。 |
| 6 | 移去粘合铝箔，弃去孵育液，每孔用250ul稀释的洗涤液洗涤微孔板4次，在纸巾上拍干除去残余液体。 |
| 10 | 在每一微孔中加入100μlTMB底物液。 |
| 11 | 室温（18-25℃）下摇床振荡（500rpm）温育20-30min。 |
| 12 | 在每一微孔中加入100μl终止液以终止底物反应，轻轻振板以使溶液混合均匀。 |
| 13 | 加终止液后15min内450nm（参考波长570-650nm）处读取OD值。 |
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