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葡萄糖6磷酸(6PG)测试盒测定意义:
6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又称6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途径的中间产物,广泛存在于动植物体和微生物中。在糖酵解的第一步反应中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通过磷酸葡萄糖异构酶的催化形成果糖-6-磷酸,以继续糖酵解的其它步骤;而在戊糖磷酸途径中,葡萄糖-6-磷酸是其第一个底物,该过程也是生成NADPH的主要途径。此外,葡萄糖-6-磷酸也能转化形成糖原或淀粉而被储存起来。
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3378 | 100管/48样 | 微量法 |
YSH3378-1 | 50管/24样 | 可见分光光度法 |
测定原理:
6-磷酸葡萄糖脱氢酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8显橙黄色,在450 nm下测定吸光值。
需自备的仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。
样品中AA提取:
1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
计算公式如下:
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
注意事项:
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。
3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4.检出限为100μmol/L。
脂肪细胞脂肪酸结合蛋白ELISA试剂盒 aFABP免费代测试剂
脂肪酸结合蛋白4ELISA试剂盒 FABP-4免费代测试剂
脂肪分化相关蛋白ELISA试剂盒 ADRP免费代测试剂
脂阿拉伯甘露聚糖ELISA试剂盒 LAM免费代测试剂
整合素连接激酶1ELISA试剂盒 ILK-1免费代测试剂
整合素β4结合蛋白ELISA试剂盒 ITGB4BP免费代测试剂
整合素αⅤβ3ELISA试剂盒 ITG αⅤβ3免费代测试剂
整合素A5ELISA试剂盒 ITGA5免费代测试剂
真胰岛素ELISA试剂盒 TI免费代测试剂
真核细胞延伸因子2ELISA试剂盒 eEF2免费代测试剂
真核起始因子4A-IIELISA试剂盒 EIF4A2/DDX2B/EIF4F免费代测试剂
真核翻译起始因子3aELISA试剂盒 eIF3a免费代测试剂
长效甲状腺刺激素ELISA试剂盒 LATS免费代测试剂
张力蛋白4ELISA试剂盒 TNS4免费代测试剂
粘膜相关上皮趋化因子ELISA试剂盒 MEC/CCL28免费代测试剂
葡萄糖6磷酸(6PG)测试盒NADP磷酸酶(NADPase)测试盒50管/48样 可见分光光度法
6磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)/葡萄糖6磷酸脱氢酶测试盒100管/96样 微量法
6磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)/葡萄糖6磷酸脱氢酶测试盒50管/48样 紫外分光光度法
胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)测试盒100管/96样 微量法
胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)测试盒50管/48样 紫外分光光度法
NADP苹果酸酶(NADPME)测试盒100管/96样 微量法
NADP苹果酸酶(NADPME)测试盒50管/48样 紫外分光光度法
NAD苹果酸酶(NADME)测试盒100管/96样 微量法
NAD苹果酸酶(NADME)测试盒50管/48样 紫外分光光度法