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乳酸脱氢酶(LDH)测试盒
商品详情:
测定意义:
LDH(EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3391 | 100管/48样 | 微量法 |
YSH3391-1 | 50管/24样 | 可见分光光度法 |
测定原理:
LDH催化NAD+氧化乳酸生成酸,酸进一步与2, 4 - 二肼作用生成酸二腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与酸浓度成正比。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
样品中AA提取:
1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
计算公式如下:
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
1ELISA试剂盒 PRM1免费代测试剂
有丝分裂原活化蛋白激酶14ELISA试剂盒 MAPK14免费代测试剂
游离血红蛋白ELISA试剂盒 f-Hb免费代测试剂
游离肉碱ELISA试剂盒 Free Carnitine免费代测试剂
游离蛋白SELISA试剂盒 FP-S免费代测试剂
幽门螺旋菌抗体ELISA试剂盒 IgA免费代测试剂
幽门螺旋杆菌IgMELISA试剂盒 Hp-IgM免费代测试剂
幽门螺杆菌细胞毒素相关基因蛋白A-IgGELISA试剂盒 HP-CagA-IgG免费代测试剂
优球蛋白ELISA试剂盒 EL免费代测试剂
隐热蛋白ELISA试剂盒 NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1免费代测试剂
吲哚胺ELISA试剂盒 INDO免费代测试剂
抑制素β-AELISA试剂盒 INHBA免费代测试剂
抑制素ELISA试剂盒 INH免费代测试剂
异质性胞核核糖核蛋白RELISA试剂盒 hnRNP R免费代测试剂
异质性胞核核糖核蛋白P2ELISA试剂盒 hnRNP P2免费代测试剂
乳酸脱氢酶(LDH)测试盒蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒50管/48样 紫外分光光度法
硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒100管/96样 微量法
硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒50管/48样 可见分光光度法
还原酶(GR)测试盒100管/96样 微量法
还原酶(GR)测试盒50管/48样 紫外分光光度法
还原型(GSH)测试盒100管/96样 微量法
还原型(GSH)测试盒50管/48样 可见分光光度法
氧化型(GSSG)含量测试盒100管/96样 微量法
氧化型(GSSG)含量测试盒50管/48样 可见分光光度法
注意事项:
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。
3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4.检出限为100μmol/L。