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分子克隆和质粒载体构建服务
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分子克隆和质粒载体构建服务|实验技术服务
测序实验流程:
分子克隆的相关载体: DNA的片段的克隆需要合适的载体,载体或是质粒,或是噬菌体,或是病毒,通常大多经过人工改造。作为载体必须具备两条件:-是该载体在细胞内必须能自主复制, 即必须具备复制原点;二是该载体必须具备适合的酶切位点,且这些酶切位点不在复制原点区域内。以上两条,保证了载体的可繁殖性和可利用性。为了便于获得阳隆克隆,载体上常有筛选标记,如对抗菌素的抗性,某些基因产物的显色反应等。
服务要求:
1、请以邮件等形式告知我们服务的主要目的及具体要求。
2、提供外源DNA的来源及背景资料。DNA来源包括: PCR扩增产物; RT - PCR扩增产物;从其它质粒上酶切得到的DNA*#片段等。
3、提供DNA的片段的电泳照片,并请标明Marker有浓度。
4、提供载体来源与背景资料。
5、注明克隆使用的酶切位点以及是否需要平端连接等。
相关材料说明:
1、对于实验材料中涉及病原体等危险材料不接受。
2、实验中涉及的碱基序列请以邮件的形式发到我中心。
3、实验中的使用载体要尽量提供背景资料: (质粒大小, 抗性,拷贝数,多克隆位点等)如果是商品化载体,请您提供生产厂家及标准名称;如果所提供载体是您自己构建的请注明大体结构情况。
4、我中心可以提供常用的如(氨苄青霉素,氯霉素,卡那霉素)以外的抗生素需您提供。
5、您自己提供的引物如果为干品,请您标注具体的OD数,如果是液体态,请您标明浓度。
6、可以用甘油菌和穿刺菌形式邮寄菌体。
(#*好同时提供相应的质粒) ;如果提供质粒,则质粒的量*#好在4ug以上;如果提供的是PCR产物,则PCR产物量在5u以上(附上电泳图)
7.用于提取RNA/DNA的材料要新鲜。采样时应首先在液氮中速冻,保存在- 80度的冰箱中,使用干冰运输。
结果提供:
1、相关的实验说明和相关的酶切图片。
2、测序的结果。
3、构建好的载体和菌液各-份。
4、如有鉴定的客户提供PCR鉴定图片。
实验代做服务:
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