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细菌样本RNA稳定液
细菌样本RNA稳定液稳定细菌样本中的RNA
RNAprotect Bacteria Reagent可在RNA纯化步骤前立即稳定RNA,从而确保可靠的基因表达和分析数据。在细菌培养基中直接加入试剂即可稳定革兰氏阳性和革兰氏阴性菌。
性能
RNAprotect Bacteria Reagent可在纯化RNA前,立即稳定样本,避免RNA降解和表达谱变化。RNAprotect Bacteria Reagent适合多种细菌样本,包括革兰氏阳性菌(如:Staphylococcus aureus和Mycobacterium avium)和革兰氏阴性菌(如:Escherichia coli和Salmonella typhimurium)。在纯化RNA前,细菌可在限制培养基或*培养基中生长。
原理
使用传统方法收集细胞并纯化RNA时,有可能导致细菌表达谱出现巨大变化。RNA酶降解会导致转录产物减少或缺失,因为细菌mRNA分子通常仅有几分钟的半衰期。此外,在加工和处理样本过程中,基因可能会被诱导,导致某些转录产物的表达水平升高。RNAprotect Bacteria Reagent可在纯化RNA前,立即稳定RNA,避免出现以上问题。
操作流程
在纯化RNA前,将2体积的试剂直接加入1体积的细菌培养基中,可立即稳定RNA。这种稳定方法可实现高效的细菌裂解,有多种实验方案可供选择:酶裂解、机械破碎或这两种方法结合使用。QIAGEN推荐使用TissueLyser进行高效的机械破碎。
应用
RNAprotect Bacteria Reagent稳定的细菌可应用RNeasy Kits分离总RNA。
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