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面议中文名称 | 总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒 (ABTS法) |
规格 | 96样 |
货号 | A-035-SH |
价格 | 面议 |
样本类型 | 血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液、细胞培养上清液等 |
检测范围 | 详见说明书 |
检测方法 | 微量法 |
货期 | 3-5天 |
说明书 | 咨询我司业务员获取 |
文献 | 咨询我司业务员获取 |
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
ABTS 法是使用zui广泛的间接检测方法,可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。ABTS 经氧化后稳定的蓝绿色阳离子自由基 ABTS+,能溶于水相或酸性乙醇介质中,在 734nm处有最大吸收。被测物质加入 ABTS+溶液后,所含抗氧化成分能与 ABTS+发生反应而使反应体系褪色。在 734nm 检测吸光度的变化,并以 Trolox 作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。
恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。
提取液:液体 120mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:粉剂×2 瓶,4℃避光保存。
(1) 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
血浆(制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用 EDTA抗凝)4℃,5000rpm 离心10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过30 d)后再测定。
(2) 组织样品
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
(3) 细胞样品
按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
1、 酶标仪预热 30min,调节波长至 734nm。
2、 工作液的配置:临用前取试剂二一瓶,加入 11mL 试剂一,震荡混匀 20min 后,静置, 取上清使用。(注意,现配现用)
3、操作表(在 EP 管中反应)
空白管 | 测定管 | |
提取液(μL) | 10 | |
样品(μL) | 10 | |
工作液(μL) | 190 | 190 |
充分混匀,10min 内测定 734nm 吸光值,△A= A空白-A测定 |
注意:空白管只需测定一次,吸取工作液时不要吸到底部沉淀,若A 测定小于 0.4,需用提取液稀释后检测。