产品分类：DNA溶液

储存条件：室温,12个月

用途：缓冲液

注意事项：无菌溶液，主要由Tris、氯化镁组成。

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。

松鼠葡萄球菌磷化抑癌蛋白EZH2抗体Human PPP1R9A ELISA Kit血浆抗凝蛋白S(PS)

Pseudomonas batumici 组蛋白去甲基化JARID1B抗体Human PPP1CC ELISA Kit血浆抗凝蛋白C(PC)

少孢哈萨克斯坦酵母硫角质抗体Human PPP3R2 ELISA Kit血浆(KLKB1)

玫烟色棒束孢角质生长因子调节蛋白2抗体Human PPP2CA ELISA Kit血浆胆固酯转移蛋白(CETP)

Bacillus sp.离子通道蛋白G蛋白4抗体Human PPP2R1B ELISA Kit血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)

海假交替单胞菌通道多聚体结构域KCTD18抗体Human PPP2CB ELISA Kit血红氧合2(HO-2)

多主葡萄壳菌胞质接头蛋白Keap1Human PPP1CC ELISA Kit血红氧合1(HO-1)

芽胞杆菌舞蹈症相关蛋白KALRN抗体Human PPP1R10 ELISA Kit血红加氧2(HO-2)

多粘类芽孢杆菌内流通道蛋白Kir4.1抗体Human PPP2R2A ELISA Kit血红加氧1(HO-1)

金黄亚种样蛋白3抗体Human PPP2R2B ELISA Kit血红加氧(HO)

酿酒酵母KLF样转录因子7抗体Human PPP1R7 ELISA Kit血红蛋白晚期糖基化终末产物(Hb-AGE)

枯草芽孢杆菌Kelch样蛋白8抗体Human PPP3CB ELISA Kit血红蛋白β亚基(HB-β)

鸡新城疫病血凝抑制试验（HI）阳性血清离子通道蛋白家族KCNQ2抗体Human PPP1R8 ELISA Kit血红蛋白α亚基(HB-α)

黑曲霉离子通道多聚体结构域蛋白7抗体Human PPP3CC ELISA Kit血红蛋白H(HbH)

黄杆菌通道蛋白1抗体Human PPP1R9A ELISA Kit血红蛋白C(HbC)

大斑凸脐蠕孢电压门控通道蛋白1抗体Human PPP3R2 ELISA Kit血红蛋白(Hb)

新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 质量规格：>97.0%(T)去氢木香内酯

苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格：>97.0%(T)百秋李

巴斯德毕赤酵母Pichia│pastoris 质量规格：>96.0%(GC)β-胡萝卜
λ退火缓冲液Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit  小鼠粘蛋白/粘液su5B规格： 48T

Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit   小鼠垂体腺suan环化mei激活肽规格： 48T

Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA Kit  小鼠抗单链DNA/变性DNA规格： 48T

Mouse phosphatidylserine,PS ELISA Kit  小鼠磷脂酰丝氨suan规格： 48T

Mouse choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISA Kit  小鼠磷suan甘油酯规格： 48T