大鼠免疫球蛋白A（IgA）ELISA检测试剂盒准备试剂与收集血样：
1. 收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃ ）保存，避免反复冻融。
2. 标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，配成1200ng/ml的溶液。设标准管8管，管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul 。在管中加入1200ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1：10倍稀释（示例：1ml浓稀液+9ml蒸馏水）。
4. 洗涤液：用重蒸水1：20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）。

实验流程:
1. 产品仅用于科研实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul ，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液100ul 。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置37℃30分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置37℃暗处反应15分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
注意事项:
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10．如与英文说明书有异，产品仅用于科研以英文说明书为准。
注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。