Hoechst 33342 染色液

产品简介:

Hoechst 33342/PI 双染试剂盒（Hoechst 33342/PI Double Stain Kit）采用Hoechst 33342和碘化丙啶（PI）双染的方法以区分凋亡细胞和坏死细胞的试剂盒。其检测原理是：细胞核荧光染料Hoechst 33342可以穿透细胞膜，嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。对于正常细胞，其可少许进入细胞膜使其染上低蓝色。而凋亡细胞由于细胞膜通透性增强，从而使得进入凋亡细胞内的Hoechst 33342明显多于正常细胞，荧光强度比正常细胞要高。另外，细胞发生凋亡时染色质会固缩，从而使得染料能更有效和聚集的结合于DNA，并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受损而不能有效的将Hoechst 33342排除到细胞外使其在细胞内的积累增加，这些特征都使得凋亡细胞经染色后荧光会比正常细胞明显增强。但细胞核荧光染料PI不能穿透细胞膜完整的正常细胞或凋亡细胞，即活细胞对PI染料拒染。而对于坏死细胞，其细胞膜的完整性在早期即已丧失，可被PI染色。

产品描述:

本产品为液体(1X)染色液，已经过 0.1μm过滤，不含细菌、支原体等。

浓度：1mg/mL

规格:  1ml/支

有效期: 12个月

储存温度: -20℃ 

运输条件：低温运输 

使用说明

Hoechst 33342 使用介绍：

※  Hoechst 33342也被称为：bisBenzimide H33342 或者 HOE33342。

※  Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料产品，对细胞的毒性相对较低。  

※  Hoechst 33342 染色经常用在细胞凋亡检测过程中使用，染色后可采用荧光显微镜进行观察或采用流式细胞仪检测。Hoechst 33342 也可用于普通细胞核染色使用或DNA染色过程使用。

※  Hoechst 33342 的最大激发波长：346nm，最大发射波长：460nm；Hoechst 33342 和 双链DNA进行结合后的最大激发波长：350nm，最大发射波长：461nm。 

※  Hoechst 33342可溶于水，溶解度可以达到 20mg/ml。

※  用于细胞核染色过程时，Hoechst 33342的工作浓度是：0.5-10ug/ml。Hoechst 33342 荧光染料能少许进入细胞膜中，使喜宝妈们染上低蓝色，然而 凋亡细胞膜通透性增强，所以进入凋亡细胞的 Hoechst 33342 要比正常细胞的量大，凋亡细胞荧光强度要比正常细胞的高，除此之外，凋亡细胞的染色体DNA 结构发生改变后，使该染料可以更有效的与 DNA 进行结合，且凋亡细胞膜上的 p-糖蛋白泵功能受到损伤后不可以有效的将 Hoechst 33342 排出到细胞外，使之在细胞内积累增加，都会让凋亡细胞的蓝色荧光增强。然而 PI染料 是不能进入到细胞膜完整的正常细胞以及凋亡细胞中，所以活细胞对 PI染料拒染，但坏死细胞由于膜完整性在早期已经被破损，所以是可以被PI染料进行染色的。根据以上特性，用 Hoechst 33342 结合 PI染料对凋亡细胞进行双染色，就可以在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞以及坏死细胞进行区别来。

※ 在双变量流式细胞仪散点图上，这三群细胞分别表现为：正常细胞为低蓝色/低红色（Hoechst 33342+/PI+），凋亡细胞为高蓝色/低红色（Hoechst 33342++/PI+），坏死细胞为低蓝色/高红色（Hoechst 33342+/PI++）。

注意事项

1. 实验前需戴好防护眼镜，穿戴防护服和口罩，佩戴手套，避免与皮肤接触。

2. 实验过程中如遇到有毒或者刺激性物质及有害物质产生，必要时实验操作需要手套箱内完成以免对实验人员造成伤害。

3. 取样品的移液枪头需及时更换，必要时为避免交叉污染尽可能选择滤芯吸头。

4. 称量药品时选用称量纸，并无风处取药和称量以免扬撒，试剂的容器使用前务必确保干净，并消毒。

5. 取药品时尽量采用多个药勺分别使用，使用后清洗干净后，烘干消毒存放。

6. 实验后产生的废弃物需分类存储，并交于专业生物废气物处理公司处理，以免造成环境污染。

购买说明

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