碘化丙啶(PI)溶液（50ug/ml）

产品简介：

碘化丙啶（PI）是一种核酸荧光染料，它不能透过完整的细胞膜，但能够透过死细胞和凋亡中晚期细胞的细胞膜而使细胞核染色。因此，PI 作为荧光探针常用于细胞凋亡（apoptosis）或细胞坏死（necrosis） 的检测。在流式细胞分析中，PI 常与其他染料如Calcein-AM、Hoechst 33258 或Hoechst 33342 联合使用，来区分凋亡早晚期细胞以及死细胞。此外，PI 也常作为多色荧光染色的复染剂使用。

产品描述:

本产品为液体(1X)，已经过 0.1μm过滤，不含细菌、支原体等。

规格:10mL/支

有效期: 12个月

储存条件：-20℃

运输条件：低温运输

使用说明

1. 用于细胞凋亡(apoptosis)或细胞坏死(necrosis)的检测，常用于流式细胞仪分析；

2. 常被用来与 Calcein, AM、Hoechst 33258 或 Hoechst 33342 等一起使用，能同时对活细胞和死细胞染色。

操作步骤

操作步骤（仅供参考）：

细胞样品的制备：

(1) 贴壁细胞：

① 收集上述细胞悬液到离心管内。

② 4℃离心，使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约 50ul 培养液，以免吸走细胞，

③ 加入约1ml 提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至 1.5ml 无菌离心管。

④ 4℃离心，使细胞沉到管底。

⑤ 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50ulPBS，以免吸走细胞。

⑥ 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。

(2) 悬浮细胞：

① 4℃离心，使细胞沉到管底。

② 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50ul 培养液，以免吸走细胞。

③ 加入约1ml提前预冷的 PBS, 重悬细胞，并转移至 1.5ml 无菌离心管。

④ 4℃离心，使细胞沉到管底。

⑤ 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50ul PBS， 以免吸走细胞。

⑥ 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。

细胞的固定：加入1ml冰浴预冷70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4℃条件下        

固定2h或更长时间。4C固定 12~24h 可能效果更佳。

（3）细胞的清洗：

① 4℃离心，使细胞沉到管底。

② 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50 ul 溶液，以免吸走细胞

③ 加入约1ml 提前预冷的 PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml 无菌离心管。

④ 4℃离心，使细胞沉到管底。

⑤ 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50ul PBS,以免吸走细胞。

（4）PI染色：在每个待检细胞样品中加入 500ul 配制好的PI染色工作液，轻轻重悬细胞沉淀，置于37℃避光水浴 30min.

（5）检测与分析：用流式细胞仪在激发波长 488nm 波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析软件进行细胞 DNA或 RNA 含量分析和光散射分析。

注意事项

1、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。

2、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

3、在为了获得细胞沉淀的离心的过程中，对于特殊细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当提高离心力或延长离心时间。

4、如果用于组织的细胞周期与细胞调亡检测，则必须把组织消化后，制备成单细胞悬液，才可以进行检测，

5、可溶于水或 DMSO。本品用 DMSO 溶解，因 DMSO的熔点是 18.5℃，使用前请放置到室温充分溶解。

购买说明

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