Prussian Blue Iron Stain Kit

普鲁士蓝染色试剂盒（核固红法）

产品信息

产品描述

含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁，且为金黄色，故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。

Perls普鲁士蓝反应 (Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁qing化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞或间质内，其染色原理在于亚铁qing化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁qing化钾反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁qing化物。该法也是诊断学中检测灵敏度*的一种铁染色方法。

本试剂盒可用于显示局部组织内的各种出血性病变，常见于吞噬细胞内，可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广，可以进行复染。该染色液的复染液采用核固红，是zui经典、zui常用的复染液。

产品组分

运输和保存方法

冰袋运输。4℃，避光保存。有效期6个月。

使用方法

（一）石蜡切片染色：

1、组织固定于10%中性福尔马林（未提供），常规脱水包埋。

2、切片厚度4 μm，常规脱蜡至水。

3、蒸馏水水洗1 min。

4、切片入Perls stain (见注意事项3)，浸染15～30 min。5、蒸馏水充分冲洗2～5 min。

6、入核固红染色液，淡染细胞核5～10 min。

7、自来水冲洗1～5 s。

8、常规脱水透明，中性树胶封固

（二） 冰冻切片染色：

1、无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗2～3 min。

2、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，时间可以相应缩短。

（三）细胞染色：

1、4%多聚甲醛固定10～20 min。

2、自来水冲洗2次，每次2 min。

3、蒸馏水冲洗2次，每次2 min。

4、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，但操作时间应相应延长。

结果参考

含铁血黄素或三价铁，结果呈蓝色；细胞核、其他组织，结果呈红色。

阴性对照

取相同切片脱蜡至水。入5%草酸孵育2～6 h，经Perls stain，其余步骤同上。结果为阴性。

注意事项

1）使用前应恢复室温，用前请摇匀试剂。

2）工作液现配现用。

3）所有玻片及器具应洁净、无铁污染（事先经除铁处理，尤其是载玻片），Perls stain染色时，应根据样本情况调整着色时间。

4）切片脱蜡应尽量干净。组织固定常采用10%中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤。避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

5）所有切片都应使用同一个阳性对照切片，选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个很好的对照，包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。

6）每次试剂使用后，请迅速盖好密封保存，以免挥发及影响效果。

7）本试剂盒仅限于形态学染色观察使用。

8）冰冻切片和细胞染色，根据具体情况摸索实验条件。

9）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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