Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
线粒体红色荧光探针
¥425D-盐(D-Luciferin Potassium Salt)
面议MycAway支原体去除试剂(1000×)
面议TUNEL细胞凋亡检测试剂(tunel试剂盒)
面议TUNEL细胞凋亡检测试剂盒
面议Human Fibronectin 人纤维连接蛋白
面议Collagenase IV胶原酶IV型
面议D- 盐(D-Luciferin, Sodium Salt)
¥748FITC标记鬼笔环肽(FITC Phalloidin)
¥785TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽
¥785支原体喷雾剂(即用型)
面议Polybrene 聚凝胺(10 mg/mL)
面议产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Urine) 尿液外泌体快速抽提试剂盒Plus | 41207ES05 | 5 T | 1355.00 |
41207ES20 | 20 T | 3755.00 |
产品描述
Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构,存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中。Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。
本试剂盒采用*的分离技术,可以快速从尿液中获得大量完整的外泌体颗粒,适用于下游的细胞共培养、电镜分析、Western Blot、荧光定量(qPCR)和高通量测序等应用。
产品组分
编号 | 组分 | 产品编号/规格 | |
41207E05 | 41207ES20 | ||
41207-A | Exosome isolation solution(Urine) | 25 mL | 100 mL |
41207-B | Exosome Buffer | 5 mL | 20 mL |
41207-C | 50 mL过滤柱 | 5个 | 20个 |
运输和保存方法
室温运输,本试剂盒可于室温稳定保存24个月。
注意事项
1、使用前请将外泌体抽提试剂(41207-A)充分混匀。
2、产品只针对尿液样本,不适用其它血清/血液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提;如果需要进行细胞上清外泌体分离,请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。
3、如果想要进一步纯化外泌体,可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、本产品仅作科研用途!
操作方法
样品预处理:
1、收集新鲜的样品,置于冰上待用;若为冻存的样品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解冻,待*融化后置于冰上待用。
2、取25 mL(单次样品量不能低于25 mL)体液样品转移至离心管中,4℃,3000 × g离心10 min,弃沉淀(可多次离心至无明显沉淀),并将上清转移至过滤柱(41207-B)中。(可多次离心至无明显沉淀)
3、将过滤柱转移至离心机中,4℃,3000×g离心10min,取过滤柱收集管中的液体,转移至新管中。
外泌体分离:
1、向预处理后的样品中,按照下表加入Exosome isolation solution (其他样品量根据表中试剂用量进行等比例变换)。
Urine | 41207-A 试剂用量 |
25 mL | 5 mL |
50 mL | 10 mL |
2、盖紧离心管盖,涡旋振荡1 min,放置于4℃冰箱静置2 h。
3、取出装有混合液的离心管,4℃,10,000×g离心60 min,弃上清(尽可能吸净上清液),收集富含外泌体的沉淀。
4、吸取一定量体积的Exosome Buffer溶液均匀吹打离心沉淀物,待其充分悬浮于Exosome Buffer后,将悬液转移至新的1.5 mL离心管中。
【注】加入Exosome Buffer的量,建议根据初始样本的体积决定,初始样本体积:Exosome Buffer体积=50:1。
5、将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃,12,000×g离心5 min,弃沉淀,保留上清液,该上清液即富含外泌体颗粒的溶液。
【注】此时如果依然可以看到明显的沉淀,建议重复步骤5,多次离心至无明显沉淀。
6)外泌体的保存:纯化后的外泌体可于4℃保存3天,分装后于-80℃ 长期保存,避免反复冻融。
外泌体除菌(可选):
获得的外泌体后期需要与细胞共培养,可以使用0.22 μm的滤器进行过滤除菌。初次尝试时,外泌体浓度在10-100 μg/mL内做梯度摸索,选择一个较为合适的条件。
HB220107