Yeasen/翌圣生物 品牌
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人细胞程序性死亡-配体1 (PD-L1)也称为表面抗原分化簇274（cluster of differentiation 274，CD274）或 B7同源体（B7 homolog 1，B7-H1），是人类体内的一种蛋白质，由CD274基因编码。PD-L1 是大小为 40kDa 的第一型跨膜蛋白，据信其在某些特殊情形（例如怀孕、组织移植、自体免疫疾病，以及诸如肝炎等某些疾病）下，与免疫系统的抑制有关。正常情形下免疫系统会对聚集在淋巴结或脾脏的外来抗原产生反应，促发具抗原特异性的细胞毒杀性T细胞（CD8+ Tcell增生）。而细胞程序性死亡受体-1（PD-1）与细胞程序性死亡-配体1（PD-L1）结合，可以传导抑制性的信号，减低淋巴结CD8+ T细胞的增生， 而且PD-1还可以借由调节Bcl-2基因，控制淋巴结中抗原特异性T细胞的聚积。
翌圣Human PD-L1 / B7-H1 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人细胞程序性死亡-配体1(Human PD-L1 / B7-H1)。特异性抗人细胞程序性死亡-配体1抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人细胞程序性死亡-配体1与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体（标记）孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人细胞程序性死亡-配体1的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
货号 | 97043ES48 / 97043ES96 |
规格 | 48 T / 96 T |
检测范围 | 156.3-10000 pg/mL |
检测方法 | 双抗夹心法 |
检测时长 | 4.5小时 |
灵敏度 | 2.0 pg/mL |
稀释线性 | 94.6 - 128.3% |
回收率 | 74.3 - 106.8% |
板内差 | 3.2% |
板间差 | 6.3% |
实验数据
标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
浓度（pg/mL） | 显色值 | 平均值 | 校准值 | |
10000.0 | 2.695 | 2.657 | 2.676 | 2.625 |
5000.0 | 2.075 | 2.047 | 2.061 | 2.010 |
2500.0 | 1.460 | 1.444 | 1.452 | 1.401 |
1250.0 | 0.933 | 0.925 | 0.929 | 0.878 |
625.0 | 0.595 | 0.569 | 0.582 | 0.531 |
312.5 | 0.354 | 0.339 | 0.347 | 0.296 |
156.3 | 0.212 | 0.197 | 0.204 | 0.154 |
0.0 | 0.052 | 0.050 | 0.051 | / |
灵敏度检测
人PD-L1的检测限为2.0 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次，评估酶标板间的精密度。
项目 | 板内精密度 | 板间精密度 | ||||
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
20 | 20 | 20 | 36 | 36 | 36 | |
平均值 | 4556.3 | 1196.1 | 302.9 | 4801.1 | 1240.1 | 314.6 |
标准差 | 203.58 | 27.89 | 8.77 | 415.38 | 61.13 | 17.08 |
变异系数（%） | 4.5 | 2.3 | 2.9 | 8.7 | 4.9 | 5.4 |
回收率检测
通过不同水平的PD-L1添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
样本类型 | 平均回收率(%) | 范围（%） |
血清 | 91.7 | 84.8-104.2 |
血浆 | 80.6 | 74.3-91.0 |
细胞培养上清 | 93.8 | 86.0-106.8 |
稀释线性检测
血清稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 102.5 | 100.8-104.8 |
1:04 | 110.1 | 103.1-119.0 |
1:08 | 111.6 | 106.0-119.6 |
1:16 | 112.9 | 106.0-118.6 |
血浆稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 104.3 | 100.8-107.7 |
1:04 | 114.8 | 112.0-117.7 |
1:08 | 117.4 | 114.7-120.0 |
1:16 | 123.2 | 117.6-128.3 |
细胞培养上清稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 97.3 | 95.4-98.9 |
1:04 | 99.0 | 94.9-101.7 |
1:08 | 96.9 | 94.6-98.4 |
1:16 | 101.3 | 99.7-102.3 |
样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
样本类型 | 样本数目 | 平均值（ng/mL） | 样本值（pg/mL） |
血清 | 10 | n.d. | n.d. |
EDTA血浆 | 6 | n.d. | n.d. |
细胞培养上清 | 4 | n.d. | n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得156.3 pg/mL
测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人PD-L1，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant Human: | Recombinant Mouse: |
B7-1/Fc Chimera | Mouse B7-H1/Fc Chimera |
B7-2/Fc Chimera | |
B7-H2/Fc Chimera | |
B7-H3 | |
B7-H4 | |
B7-H6/Fc Chimera | |
PD-L2/Fc Chimera |
