人白介素23 ELISA 试剂盒

人白介素23 ELISA 试剂盒

参考价: ¥2000

具体成交价以合同协议为准
2024-10-11 16:17:11
750
属性:
供货周期:两周;规格:48T;货号:850.960.048;应用领域:生物产业;主要用途:用于体外定量检测人血清,血浆,缓冲液或细胞培养液中的白介素23。此试剂盒只用于科;
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规格:
48t;
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产品属性
供货周期
两周
规格
48T
货号
850.960.048
应用领域
生物产业
主要用途
用于体外定量检测人血清,血浆,缓冲液或细胞培养液中的白介素23。此试剂盒只用于科
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人白介素23 ELISA 试剂盒

参考价: ¥2000

48t 2000元 100 件可售
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北京博蕾德科技发展有限公司

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产品简介

人白介素23 ELISA 试剂盒用于体外定量检测人血清,血浆,缓冲液或细胞培养液中的白介素23。此试剂盒只用于科研,不能用于诊断。

详细介绍

Human IL-23 ELISA Kit

           

用途IL-23 ELISA试剂盒用于体外定量检测人血清,血浆,缓冲液或细胞培养液中的白介素23。此试剂盒只用于科研,不能用于诊断。

检测原理:

IL-23试剂盒应用的是夹心法固相酶联免疫吸附分析法(ELISA)。IL-23特异单克隆抗体被包被于微孔板上,已知IL-23浓度的标准品和未知浓度的样品可在此反应孔中进行检测。先将IL-23抗原和生物素标记IL-23特异单克隆抗体同时孵育。洗涤后加入亲和素过氧化物酶,孵育后洗去未结合的酶。其后加入底物,产生颜色反应,颜色的深浅与样品中IL-23的浓度成一定的比例关系。

试剂盒组成及配制:

 

试剂(2-8保存)

1x48孔的配置

产品编号:#850.960.048

 

配制

96T微孔板

1/2

即用型(已包被)

塑料板盖

2


标准品:100pg/ml

1

按瓶上的说明稀释(见试剂制备,)

标准品稀释缓冲液

1瓶(25ml

即用型

生物素标记IL-23抗体

1(0.4ml)

用生物素标记抗体稀释液稀释(见试剂制备)

生物素标记抗体稀释液

1(7ml)

即用型

亲和素-HRP

2(5ul)

0.5ml HRP稀释液预稀释(见试剂制备,)

HRP稀释液

1(23ml)

即用型

洗涤缓冲液

1(10ml)

200x,蒸馏水稀释(见试剂制备)

TMB

1(11ml)

即用型

H2SO4终止液

1(11ml)

即用型

 

自备材料:

蒸馏水;加样器:10ul, 50ul, 100ul, 200ul, 1000ul; 漩涡振荡器和磁力搅拌器

保存条件:

试剂盒保存于2-8度,

洗涤缓冲液:制备好后,2-8度可保存1周以上

标准品:制备好后即用,不要保存。

生物素标记二抗:制备好后即用,不要保存。

亲和素-HRP: 制备好后即用,不要保存。

样品收集,处理和保存:

1.       细胞培养上清:1000xg离心10分钟去除颗粒和聚合物。

2.       血清——操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

3.       EDTA,柠檬酸盐和肝素血浆可用于检测。1000Xg离心30分钟去除颗粒。

4.       如果样品不直接使用,将其分为小部分(250-500ul-70℃下保存,避免反复冻融。

如果可能,不要使用溶血和高脂血。如果血清中有大量的颗粒,检测前先离心或过滤。

注意:不要在37℃或56℃加热解冻。在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻

实验方案:

用前所有试剂置于常温


标准品浓度

pg/ml

 

样品

A

5000

5000











B

2500

2500











C

1250

1250











D

625

625











E

312.5

312.5











F

156.2

156.2











G

空白

空白











H













试剂准备:

1.  洗涤缓冲液(200x)的稀释:蒸馏水200倍稀释成1X的工作液。

2.  标准品稀释液的制备:用10X的标准品稀释液储液加入225ml蒸馏水。稀释后的溶液可在2-8度保存一周。

3.  标准品的制备按标准品瓶上的说明,加入标准品稀释液,稀释后浓度为5000pg/ml。温柔上下颠倒混匀。直接在检测板上对校准品做系列稀释,浓度范围:5000-156.25pg/ml。每次重新做实验,都需要重新做标准曲线。吸取200ul重悬后的标准品到A1, A2孔(5000pg/ml),取100ul标准品稀释液到B1, B2, C1, C2, D1,D2, E1,E2, F1, F2孔。从A1, A2孔吸取100ulB1, B2孔,用加样器反复吸排使其混合。小心不要擦到孔的内表面。同样从B1, B2孔吸取100ulC1,C2;再从C1,C2D1,D2等,从最后的两个孔(F1, F2)中吸去100ul不要。这样从A1,A2F1,F2IL-23标准品稀释液的浓度为5000pg/ml156.25pg/ml。也可在试管中进行此稀释,将稀释后的标准品直接加入反应孔中。

4.  生物素标记IL-23抗体的制备:

   生物素标记抗IL-23的稀释:每次实验前准备。根据实验的孔数,以生物素标记抗体稀释液稀释。稀释量见下表。

反应孔的数量

生物素标记抗体(ul

生物素标记抗体稀释液(ul

16

40

1060

24

60

1590

32

80

2120

48

120

3180

96

240

6360

 

5.  亲和素-HRP的稀释5ul 亲和素-HRP加入0.5ml HRP稀释液, 每次实验前准备,不要保存此稀释后液体。根据反应孔的数量进一步稀释,见下表。

 

 

反应孔的数量

亲和素-HRP(ul)

亲和素-HRP稀释液(ml)

16

30

2

24

45

3

32

60

4

48

75

5

96

150

10

检测程序

使用前,将所有试剂充分混合,不要使液体产生泡沫。根据样品数量加上空白,标准品决定所需的板条,每个样品,标准品,空白和质控都应做双份。

详细步骤

1

制备标准曲线

2

按实验方案在对应孔加入100ul标准品和样本,标准品,样本及空白孔均做复孔。

3

用塑料膜封板,室温(18-25.℃)孵育2小时加入50ul生物标记的IL-23抗体到各孔

4

用封板膜,封板,室温(18-25.℃)孵育2小时

5

去掉封板膜,按以下程序洗板:

a.  吸出孔内液体。

b.  每孔加入300ul1X的洗涤缓冲液

c.  吸出孔内液体

重复步骤bc两次

6

加入100ul亲和素-HRP溶液到各孔

7

用塑料膜封板,室温(18-25.℃)孵育30min

8

重复步骤5

9

加入100ul即用型TMB底物溶液至各孔

10

室温避光孵育1--20min,用铝箔包住反应板,   避免光照。

11

加入100ul   H2SO4到各孔,终止反应。

在分光光度计中读取结果。450nm作为初始波长,630nm作为参考波长。

结果分析

以吸光度为Y轴,相应的IL-23标准品浓度为X轴做标准曲线。样品的IL-23含量可根据其O.D.值由标准曲线推断出来。

更多产品详情,请联系Diaclone 中国区总代理北京博蕾德生物科技有限公司。

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