人血管生成素2（Ang-2）ELISA试剂盒

用途：人血管生成素2（Ang-2）ELISA试剂盒用于体外定量检测人血清，血浆，缓冲液或细胞培养液中的Ang-2含量,试剂盒可用于检测天然和重组的人Ang-2,此试剂盒只用于科研，不能用于诊断。

检测原理：

Ang-2试剂盒应用的是夹心法固相酶联免疫吸附分析法（ELISA）。Ang-2特异单克隆抗体被包被于微孔板上，已知Ang-2浓度的标准品和未知浓度的样品可在此反应孔中进行检测。先将Ang-2抗原和生物素标记Ang-2特异单克隆抗体同时孵育。洗涤后加入亲和素过氧化物酶，孵育后洗去未结合的酶。其后加入底物，产生颜色反应，颜色的深浅与样品中Ang-2的浓度成一定的比例关系。

试剂盒组成及配制：

自备材料：

蒸馏水；加样器：10ul, 50ul, 100ul, 200ul, 1000ul; 漩涡振荡器和磁力搅拌器

保存条件：

试剂盒保存于2-8度。

1X 洗脱液：配好后，2-8℃，可保存一周。

标准品稀释液：配好后，2-8℃，可保存一周。

稀释后的标准品：稀释后，立即使用，不易保存。

生物素标记抗体：配好后，立即使用，不易保存。

链亲合素-HRP:配好后，立即使用，不易保存。

样品收集，处理和保存：

1.       细胞培养上清：1000xg离心10分钟去除颗粒和聚合物。

2.       血清——操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

3.       EDTA，柠檬酸盐和肝素血浆可用于检测。1000Xg离心30分钟去除颗粒。

4.       如果样品不直接使用，将其分为小部分（250-500ul）-70℃下保存，避免反复冻融。

如果可能，不要使用溶血和高脂血。如果血清中有大量的颗粒，检测前先离心或过滤。

注意：不要在37℃或56℃加热解冻。在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻

检测程序

使用前，将所有试剂充分混合，不要使液体产生泡沫。根据样品数量加上空白，标准品决定所需的板条，每个样品，标准品，空白和质控都应做双份。

注：制备的生物素标记抗Ang-2及亲和素-HRP应立即使用。

结果分析

以吸光度为Y轴，相应的Ang-2标准品浓度为X轴做标准曲线。样品的Ang-2含量可根据其O.D.值由标准曲线推断出来。

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