染色质免疫共沉淀

服务简介：

染色质免疫共沉淀技术主要应用于验证及探寻体内环境中，蛋白质和DNA的直接相互作用，旨在探索特定蛋白质在DNA上的特定结合序列，常在研究转录调控以及组蛋白修饰中被应用到。

服务原理：

在活细胞状态下固定蛋白质－DNA复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的 DNA 片段，通过对目的片断的纯化与检测，从而获得蛋白质与 DNA 相互作用的信息。

服务优势：

完善的实验平台：全进口的仪器试剂，高标准甲醇交联、Bioruptor超声打断；
2. 专业的实验流程：*的ChIP优化流程，个性化实验方案，IP效率高，高成功率（高于95%）；
3. 丰富的实验经验：专业的ChIP服务部门，实验人员从事ChIP实验长达5年以上，上千次成功ChIP实验经验，针对不同动植物组织有不同的前处理方式。
服务流程：
1、样品准备：培养细胞(若样品为组织，可先培养原代细胞)；固定，或者直接活细胞送样。
2、细胞固定：此步骤目的为将结合在DNA上的蛋白用共价形式交联在所结合的位点上，避免在之后的操作步骤中脱离丢失。直接将甲醛加入细胞培养液，摇晃固定10分钟后，迅速加入2.5M甘氨酸解交联5分钟，PBS洗涤，刮下细胞。
3、超声打碎： 此步骤目的为将长链的DNA打碎成200-1000bp的DNA片段。使用设备是超声水浴锅，EP管在冰水混合物中超声，超声后细胞悬液变得澄清透明。离心取上清。
4、免疫沉淀：此步骤是加入特异性抗体和对照IgG，和结合抗体的磁珠（或protein A/G）。经稀释后，超声产物分成两份，分别加入特异性抗体和对照IgG，轮转过夜，第二天加入磁珠轮转4小时。
5、洗涤：此步骤是减少非特异性结合。分别用稀释缓冲液、低盐溶液、高盐溶液、氯化锂溶液以及TE缓冲液洗涤共7次。用洗脱缓冲液在65℃洗脱过夜。
6、DNA纯化：将洗脱的产物用DNA纯化试剂盒纯化，得到50ul纯化产物，用于检测ChIP结果。

收费标准/服务周期/提供结果：
详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。

【本公司合作项目】
慢病毒，腺病毒，RNAi类，分子生物实验，病理实验，免疫学实验，细胞实验，动物实验，蛋白组学实验等，能够进行药效学评价、毒理学评价、细胞药筛、动物建模、病理检测、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析服务！

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