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凝胶迁移实验EMSA
服务目的:
检测待测样品中特定目的核蛋白的转录调控活性。
服务原理:
蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合,在琼脂糖胶或非变性胶中电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢,即表现为相对滞后。该方法可用于检测DNA结合蛋白、RNA结合蛋白,并可通过加入特异性的抗体(supershift)来检测特定的蛋白质,进行未知蛋白的鉴定。
服务材料:
试剂:核蛋白提取试剂盒、bradford法蛋白含量测定试剂盒、生物素标记 3’端 DNA试剂盒、Lightshift EMSA Optimization & Control Kit、化学发光法核酸检测试剂盒。
仪器:恒温培养箱、蛋白电泳仪、低温冰箱。恒温水浴箱、紫外交联灯、振荡器、脱色摇床。
服务方法:
1、核蛋白样本提取与蛋白定量。
2、生物素标记DNA3’端并去吹TdT。
3、Super-Shift反应,配制6.5%聚丙烯酰胺凝胶,配制好各反应体系,EMSA室温结合反应20min,电泳上样。
4、电转膜,操作方法同常规Western blot转膜操作。
5、紫外交联,将核酸交联于PVDF膜上。
6、化学发光法检测生物素标记的探针。
客户提供:
1、客户提供组织、细胞,公司提取核蛋白并进行蛋白浓度测定;
2、客户提供核蛋白,公司进行蛋白浓度测定;
3、客户提供已知浓度的核蛋白,公司进行EMSA实验。
交付内容:
样品质检报告、实验数据分析、实验方法及样品EMSA电泳图。
收费标准/服务周期/提供结果:
详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
【本公司合作项目】
慢病毒,腺病毒,RNAi类,分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验等,能够进行药效学评价、毒理学评价、细胞药筛、动物建模、病理检测、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析服务!
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