TRIzol一步法总RNA提取试剂
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15596-026TRIzol一步法总RNA提取试剂

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具体成交价以合同协议为准
2015-09-22 15:29:09
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产品简介

上海试剂销售强势供应TRIzol一步法总RNA提取试剂,100%保证*,*!是各大实验室的*!订购:

详细介绍

名称:TRIzol一步法总RNA提取试剂

货号:15596-026

英文名称:TRIzol Reagent;TRIzol

保存条件:厂商要求的保存温度


数量:现货供应,!


品牌:invitrogen


规格:100ML



 上海试剂销售强势供应TRIzol一步法总RNA提取试剂,100%保证*,!是各大实验室的*!订购:


TRIzol一步法总RNA提取试剂简介 :

TRIzol 是一种新型总 RNA 抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总 RNA 。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。

TRIzol 在破碎和溶解细胞时能保持 RNA 的完整性,因此对纯化 DNA 及标准化 RNA 的生产十分有用。

TRIzol一步法总RNA提取试剂的成分 :

 TRIzol 的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能*抑制 RNA 酶活性,因此 TRIzol 中还加入了 8 -羟基喹啉、异硫氰酸胍、 β- 巯基乙醇等来抑制内源和外源 RNase  RNA 酶)。

    0.1%  8 -羟基喹啉可以抑制 RNase ,与氯仿联合使用可增强抑制作用。

    异硫氰酸胍属于解偶剂,是一类强力的蛋白质变性剂,可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失,导致细胞结构降解,核蛋白迅速与核酸分离。

    β- 巯基乙醇的主要作用是破坏 RNase 蛋白质中的二硫键。

TRIzol一步法总RNA提取试剂的使用方法 : 

  用匀浆器将组织磨碎,加入 TRIzol 处理组织。 5 分钟后加入氯仿,以每分钟 12000 转离心 5 分钟,样品即分成水样层、中间层和有机层。

    RNA 存在于水样层中,收集水样层后可以通过异丙醇沉淀 RNA 来还原。

    在除去水样层后,有机层中的 DNA 和蛋白质也能相继以沉淀的方式还原:乙醇能使中间层的 DNA 沉淀析出,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白质。

  每 100ml TRIzol 可以抽提 100 个六孔板中的样品或 100  50-80mg 的组织样品。无论样品是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织 (50-100mg) 和细胞 ( 约五百万个 ) 及大量的组织 (≥1g) 和细胞 ( 超过一千万个 ) 均有较好的分离效果。

  每一百万细胞用 TRIzol 抽提可得 5-15 微克 RNA ,每毫克组织用 TRIzol 抽提可得 1-10 微克 RNA (产量因细胞和组织不同而异)。

   TRIzol 操作上的简便性允许其同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。

   TRIzol 抽提的总 RNA 能够避免 DNA 和蛋白质的污染,故而能够作 RNA 印迹分析、斑点杂交、 poly(A)+ 选择、体外翻译、 RNA 酶保护分析和单分子克隆( PCR )。

    如果是用于 PCR ,当两条引物位于单一外显子内时,建议用级联扩大的 DNase I(Cat. No. 18068) 来处理抽提的总 RNA 

    TRIzol 试剂能促进不同种属、不同分子量大小的多种 RNA 的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的 RNA 经过琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于 7kb  15kb 之间的不连续的高分子量条带( mRNA  hnRNA 成分),两条优势核糖体 RNA 条带位于 ~5 kb (28S)  ~2 kb (18S) ,低分子量 RNA 介于 0.1  0.3kb 之间 (tRNA, 5S) 。当抽提的 RNA  TE 稀释时,其 A260/A280 比值 ≥1.8 。抽提小 RNA 时宜 -70  沉淀。

   TRIzol 对人体有害,使用时应戴一次性手套,注意防止溅出。

acterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C.

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