SOLARBIO/索莱宝 品牌
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¥801.产品简介
索莱宝肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经HPLC纯化,纯度高,特异性高,并且不含其他蛋白酶。肠激酶(EC 3.4.21.9)是一个特定的蛋白酶,它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸-赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。
2.产品优势
高纯度
高特异性
1)特定的蛋白酶,切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸- 赖氨酸(DDDDK)
2)不含其他蛋白酶,无非特异性切割
3.产品用途
用于去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签
4.产品特性
来源 | 重组大肠杆菌 |
分子量 | 理论MW:25,850DA |
活性定义 | 1U定义为在25℃,12h-16h之内,将50ug保存于25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中的融合蛋白切割达95%所需的酶量。 |
储存 | -20℃ |
稳定性 | 可以在常温下运输,在25℃可稳定保存一周,酶液可以反复冻融数次,对酶活无影响 |
酶切条件:
按照酶活性定义,重组EK酶切条件举例:25mM Tris-HCl 8.0体系中:
融合蛋白浓度 0.1-1mg/ml (蛋白总量50-100μg)
重组EK用量 1-2U
温 度 25℃
过一晚酶切,或*酶切需12h-16h。
常见影响肠激酶活性的因素
在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果受影响。可参照以下*方法进行酶切:
1)为获得理想酶切结果,请将样品透析到25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中,再进行酶切。
2)若不便透析,可将样品稀释,咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白的比例不变(即1U酶切50μg蛋白)。
3)如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也可达到较好酶切效果。
EK酶目前越来越多的实验中用到重组肠激酶,我们平常也称之为EK酶,肠激酶是一种特异性蛋白酶因蛋白质底物构象,肠激酶能在其他碱性氨基酸残基处发生切割,所以我们在运用的时候特别的注意,下面我们来详细的了解下上海普迈生物提供的EK酶的资料
肠激酶也就是EK酶,由于肠激酶具有高度专一性,水解效率高的特点,所以它被广泛地应用于基因工程产品的开发,其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂,尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。
本产品为采用重组酵母分泌表达的高纯度、高活性的牛肠激酶,适用范围广(4-45℃,pH4.5-9.5),并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。
质量保证:
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;本制品中不含有非特异性的蛋白酶切活性。
活性定义:
在37℃,16小时内将0.5毫克的Thioredoxin-NP-27 95%降解为NP-27所需要的酶量定义为1个活性单位。