品牌
生产厂家厂商性质
北京市所在地
PCR试剂 DNA退火缓冲液(5X)
面议CAS:69-52-3氨苄青霉素钠
面议索莱宝公司 dATP(100mM) solarbio P C2301 solarbio原装
面议Precast-Gel变性蛋白预制胶
面议5-溴-4-氯-β-吲哚-β-D-半乳糖苷 X-gal
面议5-溴-4-氯-3-吲哚葡萄糖苷 X-Gluc
面议DNA含量检测试剂盒(细胞周期)
面议基因工程试剂 X-gal(20mg/ml)
面议X-α-gal α-半乳糖苷酶显色底物
面议X-α-gal α-半乳糖苷酶
面议CAS:107021-38-5 X-α-gal
面议Oligo(dT)15 Prirner
面议货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
D1850-50 | 全血基因组DNA提取试剂系统 | 50ml | 360.00 |
D1850-200 | 全血基因组DNA提取试剂系统 | 200ml | 960.00 |
Solarbio-全血基因组DNA提取试剂盒
使用前请根据使用量准备一些新的容器,将10×红细胞裂解液用双蒸水稀释成1×的即用型红细胞裂解液(可一次性稀释完,也可以分次稀释,一般稀释后的红细胞裂解液可保存半年以上)。
使用说明:
自备试剂:异丙醇,75%乙醇
处理血液量 1ml 5ml 10ml
红细胞裂解液(1×) 5ml 25ml 50ml
白细胞裂解液 0.5ml 2.5ml 5ml
蛋白沉淀液 1ml 2.5ml 5ml
异丙醇 1ml 5ml 10ml
75%乙醇 1ml 5ml 10ml
DNA溶解液 100ul 0.5ml 1ml
1、 样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的血液样品):在血液样品中加入3倍体积的红细胞裂解液(请确认已经稀释过),充分颠倒混匀,12000rpm离心1min(如为大量提取并且为大离心机,可11000转离心5min),小心吸去上清,再加入2倍体积的红细胞裂解液,用移液器轻轻吹打沉淀,充分混匀,离心,弃上清,沉淀为白细胞。向沉淀中加500ul(以1ml全血为例)白细胞裂解液,振荡*混匀(或者用移液器吹打)。
2、65℃水浴10-20min,期间可颠倒离心管混匀数次,直看不见明显细胞为止。
3、加入1倍体积蛋白沉淀液(以1ml全血为例,加入500ul),充分颠倒混匀,此时会出现白色沉淀,65℃水浴5min,12000rpm离心5min(或者11000转离心10min),小心吸取上清(沉淀可能在上层,吸取下清),放入一干净离心管中,如还有沉淀,可再次离心。
4、在上清中加入1倍体积(以1ml全血为例,加入1ml)的异丙醇,混匀。12000rpm离心5min(或者11000转离心10min),此时可看到管低有少量白色沉淀。小心吸取上清,弃掉。
5、向离心管中加入75%乙醇,12000rpm离心1min(或者11000转离心2min),轻轻弃去上清液,再次离心,用移液器吸取上清,请不要接触沉淀。
6、将离心管敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将离心管中残余的乙醇去除,否则乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
7、向离心管中加入100-300ul经65℃水浴预热的DNA溶解液,室温放置让DNA自然溶解。如果DNA难于溶解,可室温放置。
8、DNA电泳检测。
Solarbio-全血基因组DNA提取试剂盒
注意事项:
1. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA段较小且提取量也下降。
2. 若试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响提取效果。
3. DNA浓度及纯度检测:得到的基因组DNA段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰, OD260值为1相当于大约 50 μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
相关产品:
D1800 全血基因组DNA提取试剂盒
E1020 EB染色液
D1010 6×DNA Loading Buffer
T1060 50×TAE 缓冲液
T1050 5×TBE 缓冲液
M1060 D2000 DNA Ladder
M1400 1kb DNA Ladder
G8142 GoldView II型核酸染色剂(5000×)