Solarbio-全血基因组DNA提取试剂盒

D1850-50Solarbio-全血基因组DNA提取试剂盒

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2024-08-19 21:50:43
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产品简介

Solarbio-全血基因组DNA提取试剂盒
使用前请根据使用量准备一些新的容器,将10×红细胞裂解液用双蒸水稀释成1×的即用型红细胞裂解液(可一次性稀释完,也可以分次稀释,一般稀释后的红细胞裂解液可保存半年以上)。

详细介绍

货号产品名称规格价格
D1850-50全血基因组DNA提取试剂系统50ml360.00
D1850-200全血基因组DNA提取试剂系统200ml960.00

Solarbio-全血基因组DNA提取试剂盒
使用前请根据使用量准备一些新的容器,将10×红细胞裂解液用双蒸水稀释成1×的即用型红细胞裂解液(可一次性稀释完,也可以分次稀释,一般稀释后的红细胞裂解液可保存半年以上)。
使用说明:
自备试剂:异丙醇,75%乙醇
处理血液量 1ml 5ml 10ml
红细胞裂解液(1×) 5ml 25ml 50ml
白细胞裂解液 0.5ml 2.5ml 5ml
蛋白沉淀液 1ml 2.5ml 5ml
异丙醇 1ml 5ml 10ml
75%乙醇 1ml 5ml 10ml
DNA溶解液 100ul 0.5ml 1ml
1、 样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的血液样品):在血液样品中加入3倍体积的红细胞裂解液(请确认已经稀释过),充分颠倒混匀,12000rpm离心1min(如为大量提取并且为大离心机,可11000转离心5min),小心吸去上清,再加入2倍体积的红细胞裂解液,用移液器轻轻吹打沉淀,充分混匀,离心,弃上清,沉淀为白细胞。向沉淀中加500ul(以1ml全血为例)白细胞裂解液,振荡*混匀(或者用移液器吹打)。
2、65℃水浴10-20min,期间可颠倒离心管混匀数次,直看不见明显细胞为止。
3、加入1倍体积蛋白沉淀液(以1ml全血为例,加入500ul),充分颠倒混匀,此时会出现白色沉淀,65℃水浴5min,12000rpm离心5min(或者11000转离心10min),小心吸取上清(沉淀可能在上层,吸取下清),放入一干净离心管中,如还有沉淀,可再次离心。
4、在上清中加入1倍体积(以1ml全血为例,加入1ml)的异丙醇,混匀。12000rpm离心5min(或者11000转离心10min),此时可看到管低有少量白色沉淀。小心吸取上清,弃掉。
5、向离心管中加入75%乙醇,12000rpm离心1min(或者11000转离心2min),轻轻弃去上清液,再次离心,用移液器吸取上清,请不要接触沉淀。
6、将离心管敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将离心管中残余的乙醇去除,否则乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
7、向离心管中加入100-300ul经65℃水浴预热的DNA溶解液,室温放置让DNA自然溶解。如果DNA难于溶解,可室温放置。
8、DNA电泳检测。

Solarbio-全血基因组DNA提取试剂盒
注意事项:
1. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA段较小且提取量也下降。
2. 若试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响提取效果。
3. DNA浓度及纯度检测:得到的基因组DNA段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰, OD260值为1相当于大约 50 μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。


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