SOLARBIO/索莱宝 品牌
生产厂家厂商性质
北京市所在地
G7210 PAGE凝胶银染试剂盒
规格: 1L
保存: 室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期12 个月。
试剂盒内容:
**银 2g
染色液A 100ml
显色液B 100ml
显色液C 100ml
终止液D 100ml
注:1L 规格指可配制的**银染色液的体积,实际使用次数根据PAGE 胶大小不同而不同。
二、G7210 PAGE凝胶银染试剂盒的简介:
核酸银染的原理是银离子可与核酸形成稳定的复合物,然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银
颗粒,可把核酸电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色。其灵敏度比EB 高200 倍,该产品
整个过程只需要20 分钟,操作简单,灵敏度高,能检测到10ng 以下的DNA 条带。
三、的使用操作步骤:
一、染色液配制
需要配制的染色液体积根据PAGE 胶的大小而定,一般的mini-PAGE 胶需要20-30mL。配制用的器皿清洗
干净后用去离子水涮洗,染色液须用去离子水配制,现用现配。如果配制的溶液体积不是100mL,可以按比例
改变各成分用量。
1,**银染液:称取0.2g **银,加入到90ml 去离子水中*溶解,加入10ml 溶液A 混匀,现用现配。
2,显色液:分别取溶液B 和溶液C 各10ml 加入80ml 去离子水中混匀,现用现配。
3,终止液:取终止液D 10ml 加去离子水稀释100ml,现用现配。
二、:
1,PAGE 电泳结束后,将PAGE 蛋白胶转移玻璃平皿或搪瓷盘中,用去离子水漂洗两遍,每次2min。
2,将PAGE 胶转移**银染液中,使染液没过PAGE 胶,室温染色10min。可置于摇床上缓慢摇晃,使
其染色均匀。
3,弃去染色液,用去离子水快速漂洗三次,每次半分钟。
4,将PAGE 胶转移显色液中,使显色液没过PAGE 胶,室温摇晃显色条带清晰可见。
5,可选,将PAGE 胶转移终止液中,终止显色1min。
6,银染后PAGE 胶可拍照保存或用于后续试验。
四、PAGE 凝胶快速银染试剂盒的注意事项:
1. 银染主要出现在PAGE 胶的表面,使用薄胶(0.5-0.75mm)可以提高灵敏度。
2. 对于考马斯亮蓝染色的SDS-PAGE 胶,可用甲醇将胶漂洗后,继续进行银染。考染过程中的乙酸会干
扰银染,因此要确保将PAGE 凝胶中残留的乙酸*洗净。
3. 不同蛋白质对银染的反应是不一样的,尤其是碱性蛋白染色效果差。因此,不宜用银染测定不同蛋白
的比例。
4. 染色过程中,缓慢的振荡是必要的,一般选择40-60 rpm.
5. 凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致,所以全程中都应带手套操作。
6. PAGE 凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的,所以溶液的配制应使用电导率小于1 μS 的去离
子水。
7. 如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面,可能是在几步漂洗过程中洗得不够
*,或是染色过程时温度太低。
8. 较深的银染背景多是丙烯酰胺中的杂质所致。
9. PAGE 胶中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100 和两性电解质这些物质会干扰银染。
10. 室温操作时,温度的波动往往会干扰银染的效果,恒温水浴可以解决这个问题。
11. 凭借戊二醛预处理可以使各种蛋白质的染色提高40 倍。
12. 染色使用的玻璃器皿必须非常干净,用酸浸泡可以满足要求。
13. 银染应尽快照相,随着时间延长,蛋白条带会变浅,而背景会加深。
14. 银染容器理想的是玻璃平皿,其次是搪瓷盘和密胺塑料盘等。
五、与PAGE凝胶快速银染试剂盒的相关产品: