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IPTG 溶液 (50mg/ml)
货号 :I1020
规格 :5mL
保存 :-20℃避光保存储存,有效期少 12 个月。
产品说明 :
IPTG 为安慰性诱导物,X-gal 为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG 可诱导载体 Lac 操纵子 DNA 区段合成 β-半乳糖苷酶氨基端片段, 该片段可与宿主细胞编码的缺陷型 β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α 互补)。 实现α 互补的细菌铺在含有 X-gal 生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源 DNA 插入质粒的多克隆位点后可破坏α 互补作用,将产生白色菌落。IPTG 也是常用的基因工程中重组蛋白表达的诱导剂。
此产品为 IPTG 用双蒸水溶解过滤后配成的无菌溶液。
使用说明 :
蛋白表达诱导 :50mg/mL 浓度为 210mM。如果终浓度要求为 0.5mM,则每升培养基中加入 2.38mL IPTG 溶液 (50mg/mL) 。如果实验中需要使用其他诱导浓度,可自行计算加入量。
蓝白斑筛选 :
(1)在 100mL 的琼脂培养基中,加入 500μL 的 X-gal 溶液(20mg/mL) 、250μL 的 IPTG 溶液(50mg/mL)和 100 μL 的 Amp(氨苄青霉素,100 mg/mL) ,制作成含 X-Gal、IPTG 和 Amp 平板培养基。高压灭菌后的培养基需冷却 55℃以下时加入 X-Gal、IPTG 和 Amp,以防失活。
(2)实际上 X-gal 和 IPTG 可以直接涂抹在平板培养基表面, 90mm 的平板,X-gal(20mg/mL)涂 40μL,IPTG(50mg/mL)涂 16μL。150mm 的平板加倍使用量,待涂布的液体干后就可以使用。细菌铺板后,37℃培养,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色菌落为具有 DNA 插入片段的基因重组体)。
注意事项 :
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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