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CCCP,即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,一种质子载体(H+ ionophore),是一种强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜,抑制光合作用;CCCP还可抑制内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素C氧化酶。
CCCP还具有其他功能:1)在牛蛙交感神经方面的实验表明,CCCP 可增强促黄体生成素释放激素的释放;2)作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli 细胞活性;3)对细胞内钙水平的各种调节效应;4)抑制脂肝酶的分泌;5)部分抑制pH梯度活化的Cl-摄取以及刷状缘膜的Cl-/Cl-交换等。
本品是溶于DMSO的CCCP溶液,浓度为50mM,体积为100μl(相当于1mg的总量),常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡,并配合线粒体膜电位检测探针JC-10(货号:J8050)来进行相关研究。
使用方法
1)收到本品(CCCP,50 mM)后按照10-50µl的小量分装,冻存在-20℃,避免反复冻融。
2)推荐工作浓度为10-100µM,初次实验可按照1000×稀释起始浓度(如1µl起始母液加入1ml细胞培养液)进行凋亡诱导20min,随后进行JC-1或者JC-10线粒体膜电位丧失检测,呈绿色荧光。
【注】:对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。