AMV Reverse Transcriptase反转录酶Promega原装
货号： M5101
规格：300u
保存: -20℃保存，避免反复冻融，保质期为2年。
产品内容：

产品简介：
    逆转录酶（AMV）从Avian Myeloblastosis Virus分离出来，经过高度纯化，不含核酸酶。可用于合成*链cDNA、制作cDNA探针、RNA转录、测序和RNA的逆转录反应。
    逆转录酶（AMV）一个活性单位U定义为：在37℃，10min条件下，使1nmol的脱氧核糖核酸掺入酸性沉淀物质所需的酶量。

使用说明：
    合成*链cDNA的步骤
    以下试剂客户自己提供
    dNTPs (10mM)
    引物（Oligo dT（18）或随机引物或特异性引物
    无核酸酶双蒸水
    RNA模板
    RNase抑制剂
RT反应（20μl体系）：
    1．使用前每个组份轻轻混匀，然后2000rpm离心20s；
    2．取灭过菌且无核酸酶的0.2ml PCR管，依次加入
               2~5μg RNA Xμl
               引物* 1μl
              【引物*：Oligo dT18 (10μM)或随机引物(50ng/μl) 或特异性引物(2μM)】
               dNTPs (10mM) 1μl
               补加无核酸酶的双蒸水总体积 15.5μl
     3．65℃保温5min，然后冰浴5min；
     4．往步骤3的PCR管中依次加入下列组份
               RNase抑制剂(40u/μl) 0.5μl
               10× AMV Reaction Buffer 2μl
               DTT ( 200mM) 1μl
               逆转录酶（AMV） 1μl
     5．轻轻混匀后，然后2000rpm离心20s；
     6．先在42℃保温1 hr，然后70℃保温15min；
     7．上述产物可立即进行下一步的PCR反应或-20℃保存。

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