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北京市所在地
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
货号:I8070
规格:1g/5g/100g
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,英文名称IPTG。为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌暴露IPTG,铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。
特性:纯度 :≥99.0% (TLC) 熔点:110-114℃
湿度(%):≤1.0 pH (5%, 水)25℃:5-7
比旋光度 (1%, 水):-34.0--29.0
溶解性:IPTG贮存液,先在8ml蒸馏水中溶解2g,定溶10ml,用0.22um滤器过滤除菌,贮存于-20℃。
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,英文名称IPTG。为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌暴露IPTG,铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。
特性:纯度 :≥99.0% (TLC) 熔点:110-114℃
湿度(%):≤1.0 pH (5%, 水)25℃:5-7
比旋光度 (1%, 水):-34.0--29.0
溶解性:IPTG贮存液,先在8ml蒸馏水中溶解2g,定溶10ml,用0.22um滤器过滤除菌,贮存于-20℃。
IPTG诱导原理
先
E.coli的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节?基因I。I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状态。在启动序列P上游还有一个分解(代谢)物基因激活蛋白(CAP)结合位点。由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区,三个酶的编码基因即由同一调控区调节,实现基因产物的协调表达。
其次
在没有乳糖存在时,lac操纵子(元)处于阻遏状态。此时,I序列在PI启动序列操纵下表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合,阻碍RNA聚合酶与P序列结合,抑制转录起动。当有乳糖存在时,lac操纵子(元)即可被诱导。在这个操纵子(元)体系中,真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞,经b-半乳糖苷酶催化,转变为半乳糖。后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导致阻遏蛋白与O序列解离、发生转录。异丙基硫半乳糖苷(IPTG)是一种作用*的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。
参考文献:
《Engineering an electroactive Escherichia coli for the microbial electrosynthesis of succinate from glucose and CO2》 作者:Zaiqiang Wu,Junsong Wang, Jun Liu, Yan Wang, Changhao Bi, Xueli Zhang 期刊:Microbial Cell Factories 影响因子:4.402 PMID:30691454
《Engineering an electroactive Escherichia coli for the microbial electrosynthesis of succinate by increasing the intracellular FAD pool》 作者:Zaiqiang Wu,Junsong Wang,Xueli Zhang,Changhao Bi 期刊:Biochemical Engineering Journal 影响因子:3.371 PMID: