SOLARBIO/索莱宝 品牌
生产厂家厂商性质
北京市所在地
索莱宝重组牛肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经HPLC纯化,纯度高,特异性高,并且不含其他蛋白 酶。肠激酶(EC3.4.21.9)是一个特定的蛋白酶,它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天 冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的 融合标签。
来源:重组大肠杆菌 理论MW:25,850Da 活性:1U定义为在25℃,12h~16h之内,将50ug保存于25mMTris-HCl8.0缓冲液中的融合蛋白切割95%所 需的酶量。
高特异性
1)特定的蛋白酶,切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬 氨酸-赖氨酸(DDDDK)
2)不含其他蛋白酶,无非特异性切割
图一:SDS-PAGE检测结果,纯化的肠激酶一个单一的主带
图二:1U的EK作用于50ug底物0min,10min,20min,30min,40min,50min,60min后的SDS-PAGE分析
图三:1U,2U,5U,10U的EK作用于50ug底物4h后和1U的EK作用于50ug底物16h后的SDS-PAGE分析
在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果受影响。
可参照以下推荐方法进行酶切:
1)为获得理想酶切结果,请将样品透析到25mM Tris-HCl pH8.0缓冲液中,再进行酶切。
2)若不便透析,可将样品稀释,咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以 下进行酶切,酶的用量与蛋白的比例不变(即1U酶切50µg蛋白)。
3)如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也 可达到较好酶切效果。
具体参照索莱宝的使用说明