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钙荧光探针 Fluo 3-AM 细胞检测
钙荧光探针 Fluo 3-AM 细胞检测产品说明
Ø Fluo-3 AM 是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。分子式为 C51H 50Cl 2N 2O 23,分子量为
1129.85。
Ø Fluo-3 和 Fura-2 相比,其优点是:一方面可以被氩离子激光(argon-ion laser) 的 488nm 激发光激发,便于检测;另一方面,Fluo-3 和钙离子结合后荧光变化更强,即对钙离子浓度变化的检测更加灵敏;同时,Fluo-3 和钙离子的结合能力较弱,这样可以比 Fura-2 检测到细胞内更高浓度的钙离子水平;此外,对于细胞内的钙离子的即时变化反应得更加准确,减小了因为和钙离子解离速度慢而导致的荧光变化滞后。
Ø 本 Fluo-3 AM (钙离子荧光探针) 是配制于无水DMSO (anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为 5mM。
Ø Fluo-3 AM 是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM 的荧光非常弱,其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。
Fluo-3 AM 进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-3 可以和钙离子结合,结合钙离子后可以产生较强的荧光,大激发波长为 506nm,大发射波长为 526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为 488nm 左右,发射波长为 525-530nm。
用于细胞内钙离子检测时,Fluo-3 AM 的常用浓度为 0.5-5μM 。通常用含有 0.5-5μM 的 Fluo-3 AM 的适当溶液和细胞一起在 20-37℃孵育 15-60 分钟进行荧光探针装载,随后适当洗涤,洗涤后可以考虑适当再孵育20-30 分钟以确保Fluo-3 AM 在细胞内*转变成 Fluo-3。
Ø 本 Fluo-3 AM 在 4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以 20-25℃水浴温育片刻全部融解后使用。
Ø 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作