总黄铜的提取和测定

总黄铜的提取和测定目的要求

     学习黄铜类化合物的测定原理和方法

总黄铜的提取和测定实验原理

    黄铜类化合物是植物的重要次生代谢产物，也是一些保健品和中药材的有效成分之一。黄铜类化合物的定量方法常用的有HPLC法和分光光度法。在实际生产和科研过程中，对于黄铜单体的定量常采用HPLC法，而对总黄铜的测定，考虑到方法的简便、快捷以及可行性，多采用在碱性介质中加铝盐显色的分光光度法。在碱性条件下黄铜类化合物与铝盐形成配位化合物、在500nm波长有zui大吸收峰。标准品选用芦丁。

试剂和器材

1）、试剂

芦丁标准品

5%NaNO₂；10%Al（NO3）3；5%NaOH；70%乙醇。

2、材料

新鲜银杏叶

3）、器材

容量瓶10mL（×7），25mL（×1），100mL（×2）；吸管0.2mL（×2），1mL（×2），2mL（×

1. ，5mL（×1）；分光光度计。

操作方法

1）、制作标准曲线

    称取芦丁标准品5mg；用70%乙醇溶解，定溶于25mL容量瓶，摇匀，得0.2mg/mL的标准溶液。

    吸取标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL，分别置于10mL容量瓶中，加入5%NaNO2 0.4mL，摇匀，放置6min；加入10%Al（NO3）3  0.4mL，摇匀，放置6min；加入5%NaOH4.0mL，摇匀，放置15min。以试剂空白作为参比溶液。用1cm比色皿，在500nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线。

2）、总黄铜的提取

    把新鲜的银杏叶低温烘干，使水分小于8%,制成干粉。称取干粉1.0g，置于100mL容量瓶中，加入70%乙醇30mL，浸泡24h。超声波提取30min，过滤用70%乙醇定溶于100mL容量瓶中，得到黄铜提取液，代用。

3）、测定

    吸取黄铜提取液1.00mL，置于10mL容量瓶中，加入5%NaNO3  0.4mL，摇匀，放置6min；加入10%Al（NO3）3  0.4mL，摇匀，放置6min；加入5%NaOH  4.0mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min。以试剂空白作为参比溶液。用1cm比色皿，在500nm波长处测定吸光度，由标准曲线法计算总黄铜含量。

注意事项

     对于某些热敏成分的提取，采用超声波破碎法效果较为理想。由于此过程是一个物理过程，浸提过程中无化学反应，被浸提的生物活性物质在一定时间内保持不变。