小RNA克隆试剂盒
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2017-05-26 16:09:25
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产品简介

小RNA克隆试剂盒克隆是分析低分子RNA的有效方法之一。由于低分子RNA不具有PolyA tail,
需在低分子RNA的5’端和3’端分别加上RNA接头或者RNA/DNA杂合形式的接

详细介绍

小RNA克隆试剂盒产品及特点
克隆是分析低分子RNA的有效方法之一。由于低分子RNA不具有PolyA tail,
需在低分子RNA的5’端和3’端分别加上RNA接头或者RNA/DNA杂合形式的接
头,经RT-PCR后便可以进行克隆。小RNA克隆试剂盒是根据以上原理开发的,其
流程图如下:
对低分子RNA进行cDNA扩增的试剂盒,经本试剂盒扩增的cDNA可以用于各种
载体的克隆。扩增得到的cDNA可以直接用于TA克隆,或者利用接头中带有的酶切
位点进行克隆。
备注
使用本试剂盒对小RNA进行克隆时的操作流程见图,详细步骤如下:
1. 将小RNA进行BAP处理,5’端去磷酸化。
2. BAP处理后的小RNA的3’端与生物素化的RNA/DNA接头连接。
3. 用标记Strepto avidin的磁珠,回收带有生物素的RNA/DNA接头的Small
RNA,然后进行5’端磷酸化反应。
4. 将5’端连接上RNA/DNA嵌合的接头后,使用RT Primer和M-MLV反转录酶
进行反转录反应。
5. 从磁珠上回收合成的cDNA后,进行PCR反应。
6. PCR片段经限制酶酶切后,回收、克隆。120101-2    谷胱甘肽琼脂糖    2mL    490    7-29
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