LBIS^® 抗dsDNA-小鼠ELISA试剂盒

　　近年来研究人员多通过使用与人具有同样的自身免疫性疾病的实验动物自然发病和人为使实验动物发症的方式来研究自身免疫性疾病的机制阐明和新型药物开发。自然发病系统代表的MRL/lpr小鼠被应用到很多实验。MRL/lpr小鼠在淋巴结肿瘤发病同时伴随着肾炎、血管炎、关节炎的高机率发病，对包含慢性风湿性关节炎（RA）模型的自身免疫性疾病发病机制的阐明，可作为有效的模型进行研究。MRL/lpr小鼠血清中被检测出自身抗体有IgG型类风湿因子（RF）、IgM型类风湿因子（RF）、抗ssDNA 抗体、抗dsDNA 抗体、抗Sm 抗体。

　　通过使用该疾病动物血清中自身抗体含量做标准曲线，通过单位转换，可进行测量之间数值的比较。

　　LBIS^® 抗dsDNA-小鼠ELISA试剂盒采用了测定小鼠抗dsDNA 抗体浓度的夹心酶联免疫测定法。

　　此试剂盒仅限研究使用。

◆特点

●全反应时间是4小时20分钟。

●测定小鼠血清或者血浆（肝素血浆除外）中的抗dsDNA 抗体浓度。

●可测定微量样本（标准操作法是5 μL）。

●1个试剂盒可做96孔。

●标准品是小鼠源。

●全部试剂均为液体。

试剂盒的保存和使用期限

　　试剂盒在2-8℃保存。此保存条件下，有效期（记载在外箱标签）内试剂盒是稳定的。开封的试剂对应保存状态可能会受到影响，请尽早使用。

◆测定原理

　　本试剂盒是标准品、稀释样本在抗原包被的微孔板中进行孵育处理。孵育2小时后清洗，加入过氧化物酶结合抗小鼠IgG抗体，与捕捉的抗体孵育2小时。清洗后，显色剂（TMB）与孔中残留的过氧化物酶反应。添加酸性溶液可终止反应。反应生成的黄色产物在450 nm处（副波长620 nm）测定。吸光度与抗小鼠dsDNA 抗体浓度成正比。标准品浓度对应吸光度可制作成标准曲线。通过标准曲线获得未知样本浓度。

◆试剂盒组成

※根据批次不同，数值有差异。

◆所需必要设备

●蒸馏水。

●标准溶液稀释用试管。

●清洗液（稀释用溶液）用玻璃器具。（量筒·瓶）

●枪头交换式移液器。（一次性枪头5 μL正规的移液枪，以及50-450 μL正规的移液枪）

●连续分装移液枪。（例：Eppendorf 的multipette plus、可进行100 μL连续分装的仪器。）

●纸巾等吸水性物品。（清洗后去除板上残留液体）

●搅拌器。（Vortex类型）

●96孔板用振荡器。（约800 rpm）

●96孔板用清洗机（若有更好）或者注射瓶。

●96孔板酶标仪。（450 ±10 nm 、620 nm：600～650 nm）

●数据分析用软件。（若有是更好）

◆试剂盒性能

●测定范围

●小鼠抗dsDNA 抗体检测范围在15.6-1000 mU/mL内。

●特异性

●本ELISA系统使用的标识抗体对抗小鼠IgG抗体具有特异性。

●与小鼠IgM的反应交差性在检测灵敏度以下。

●精密度实验

●①批次变动（N=30）平均C.V.值是4.2%

●②日差可重复性实验（N=30、3天）平均C.V.值是4.7%

LBIS^® 抗dsDNA-小鼠ELISA试剂盒