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Bst DNA Polymerase
链置换酶
◆产品说明
本产品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性，是一款自动从模板双链DNA的氢键解离，然后后合成新DNA链的酶。由于其特性，耐热性链置换DNA聚合酶无需DNA的双链解离，即可在恒定温度下合成DNA，且合成不受DNA二级结构的抑制。
特点
● 具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性
● 可在恒定温度下合成DNA
● 适用于合成GC含量高的DNA链
● 合成不受DNA二级结构抑制
应用
● 利用链置换活性的应用（等温基因扩增法等）
理想反应温度 | 60°C～65°C |
失活时间*1 | 80°C、5分钟 |
*1 将酶原液直接热变性时的失活温度
来源 | 嗜热脂肪芽孢杆菌 |
活性 | 8 units/μL |
单位定义 | 1 unit指以小牛胸腺DNA为引物/模板，在65°C，30分钟的条件下将10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物的酶量。 |
储存液成分 | 10 mmol/L Tris-HCl（pH 7.5）, 1 mmol/L DTT, 0.1% Tween 20, 0.1 mmol/L EDTA, 50% 丙三醇 |
酶反应条件 | 随酶附带10×的酶反应缓冲液（0.5 mL×1）。如反应总体积为50 μL，添加5 μL的酶反应缓冲液 |
◆产品组成
Bst DNA Polymerase（1,600 units）
产品组分 | 容量 | 保存 |
Bst DNA Polymerase（8units/μL） | 200微升×1 | -20°C |
10× Bst Reaction Buffer（80mmol/L Mg2+） | 500微升×1 | -20°C |
◆应用实例
实验案例1 LAMP法中的运用
LAMP法 反应条件
| 3.0% Agarose 21 TAE凝胶电泳 EtBr染色
M：Gene Ladder Wide 1 1：A 公司Bst DNA Polymerase 2：本公司Bst DNA Polymerase |
Candidatus Liberibacter asiaticus DNA | 1 × 106copies |
FIP* | 40pmol |
BIP* | 40pmol |
F3 Primer* | 5pmol |
B3 Primer* | 5pmol |
Loop Primer F* | 20pmol |
Loop Primer B* | 20pmol |
dNTPs Mixture | 1.4mM each |
10 × Bst Reaction Buffer | 2.5μL |
Bst DNA Polymerase | 8units |
总计 | 25μL |
反应
65°C | 60分钟 |
*引物序列
FIP: 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3'
BIP: 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3'
F3 Primer: 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3'
B3 Primer: 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3'
Loop Primer F: 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3'
Loop Primer B: 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3'
实验案例2 RCA法评估Bst DNA Polymerase的耐热性与理想反应温度
RCA法 反应溶液组成
M13mp18 single strand DNA | 40ng |
Universal primer | 50mM |
dNTPs Mixture | 1.4mM each |
Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C) | 20mM |
KCl | 10mM |
(NH4)2SO4 | 10mM |
MgSO4 | 8mM |
Tween 20 | 0.10% |
Betaine | 0.8M |
Bst DNA Polymerase | 4units |
总计 | 20μL |
反应条件
各个温度下 | 30分钟 |
结果
条带
M：Gene Ladder Wide 1
D：模板 DNA (M13mp8 single strand）
引物序列
5'-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3'
电泳条件
0.7% Agarose S/TAE凝胶电泳
EtBr染色
使用不含SDS的上样缓冲液
备注
本实验为比较两种Bst DNA Polymerase，使用相同的反应液组成进行反应。在RCA法中使用各种酶配套的缓冲液时，须进行预实验探究反应体系。
◆相关信息
备注
● 本产品为实验研究用试剂。不可作为医药品使用。
● 检测柑橘黄龙病菌的LAMP引物组合是国立研究开发法人 农业、食品产业技术综合研究机
● 构九州冲绳农业研究中心灵活运用先进技术，在农林水产研究高度化事业“抑制顽固性疾病柑橘绿化病传播的技
● 术开发”中开发的产品。
许可
● LAMP法由荣研化学株式会社持有专.利权。
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
311-07481 | Bst DNA Polymerase | 1600units |
◆相关产品
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
319-07281 | Csa DNA Polymerase | 1600units |
319-07301 | 96-7 DNA Polymerase | 1600units |
312-07271 | dNTPs Mixture（25mM each） | 400微升 |
富士胶片和光（广州）贸易有限公司是日本富士胶片和光纯药株式会社（FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation，以下称"富士胶片和光"）在中国的子公司，主营富士胶片和光品牌试剂产品，囊括合成与材料、分析、培养、生命科学、药品生产与品质管理领域。和光纯药工业株式会社（前武田药品工业株式会社）成立于1922年，2017年被富士胶片集团全面收购而成为集团成员之一。富士胶片和光是日本的试剂企业，也是优质的试剂供应商，在美国、欧洲和中国都设有分公司。自成立以来，一直致力于高品质的试剂生产与开发，并获得ISO9001，ISO/IEC17025，ISO14000等（部分）多项认证。
通过对本次收购，富士胶片集团将充分发挥其在胶片领域积累的化学合成、纳米、生产等技术，在医疗健康事业、高性能材料事业两个核心业务中实现协同增效作用。尤其是医疗健康事业，在颇具市场潜力的再生医学、生物制药等领域都将产生巨大的协同增效作用。
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随着富士胶片集团对生命科学领域的更大重视和投入，今后富士胶片和光将继续为中国客户提供更多前沿、品质可靠的产品。
