本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

大鼠 OATP1B3（OATP1B3）ELISA 技术试剂盒

使用说明书

技术原理

试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被大鼠OATP1B3（OATP1B3）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的技术抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠OATP1B3（OATP1B3）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时技术，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

大鼠 OATP1B3（OATP1B3）ELISA 技术试剂盒

自备物品

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1. 试剂盒保存在 2-8℃，使用前室温平衡 60 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再使用。样本在使用前也要在室温平衡 60 分钟。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3. 预处理后的样本无需稀释，直接取 10μL 加样即可。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成

名称 96 孔配置 48 孔配置 备注

微孔酶标板 12 孔×8 条 12 孔×4 条 无

标准品 0.3mL 0.3mL 无

样本稀释液 6mL 3mL 无

技术抗体-HRP 10mL 5mL 无

20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释底物 A 6mL 3mL 无

底物 B 6mL 3mL 无

终止液 6mL 3mL 无

封板膜 2 张 2 张 无

说明书 1 份 1 份 无

自封袋 1 个 1 个 无

注：标准品浓度依次为：12、6、3、1.5、0.75、0 ng/mL.

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

洗板方法

1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板 5 次。

2. 自动洗板机：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

操作步骤

1. 从室温平衡 60min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL；

3. 待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；

4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的技术抗体 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的OD 值。

结果判断

绘制标准曲线：在 Excel 工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD 值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值，大于等于0.9900。

2. 灵敏度：低技术浓度小于 0.1 ng/mL。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内变异系数小于 10%、板间变异系数小于 15%。

5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6 个月

免责声明

1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。

2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

相关产品：

Bovine EB0001 Bovine Serum Albumin(Serum Albumin) ELISA Kit Serum Albumin Alb(Serum albumin)/ALB/albumin/cell growth inhibiting protein 42/growth-inhibiting protein 20 9.375ng/ml 15.63-1000ng/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0002 Bovine IgG(Immunoglobulin G) ELISA Kit IgG / 0.938ug/ml 1.563-100ug/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0003 Bovine Ki-67(Antigen KI-67) ELISA Kit Ki-67 MKI67/Antigen KI-67/Ki-67/KIA/TSG126/antigen identified by monoclonal Ki-67/KIA/proliferation-related Ki-67 antigen 0.188ng/ml 0.313-20ng/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0004 Bovine PSPB(Pregnancy Specific Protein B) ELISA Kit PSPB Pregnancy Specific Protein B 1.875ng/ml 3.125-200ng/ml Competitive ELISA, Coated with Antigen 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0005 Bovine PISD(Phosphatidylserine decarboxylase proenzyme) ELISA Kit PISD / 18.75pg/ml 31.2-2000pg/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0006 Bovine LIF(Leukemia inhibitory factor) ELISA Kit LIF LIFR/LIFR/CD118/LIF R beta/LIFR/CD118/CD118 antigen/leukemia inhibitory factor receptor/leukemia inhibitory factor receptor alpha/LIF receptor/LIF-R/SJS2/STWS/SWS 18.75pg/ml 31.2-2000pg/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0007 Bovine IL-8(Interleukin 8) ELISA Kit IL-8 IL-8/IL8/CXCL8/GCP-1/GCP1/LECT/LUCT/LYNAP/MDNCF/MONAP/NAF/NAP-1/NAP1/3-10C/AMCF-I/K60 18.75pg/ml 31.2-2000pg/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0008 Bovine TNF-Α(Tumor necrosis factor alpha) ELISA Kit TNF-Α TNF-α/DIF/TNF-alpha/TNFA/TNFSF2 0.094ng/ml 0.156-10ng/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0009 Bovine CRP(C-Reactive Protein) ELISA Kit CRP PTX1/Pentraxin 1 18.75pg/ml 31.2-2000pg/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0010 Bovine TGF-β(Transforming Growth Factor Beta) ELISA Kit TGF-β / 18.75pg/ml 31.2-2000pg/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0011 Bovine HP(Haptoglobin) ELISA Kit HP HP/HP-1/hp2-alpha/HPA1S/binding peptide/BP/haptoglobin alpha(1S)-beta/haptoglobin alpha(2FS)-beta/haptoglobin, alpha polypeptide/haptoglobin, beta polypeptide/HP2AL/PHA2 0.469ug/ml 0.781-50ug/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0013 Bovine PRL(Prolactin) ELISA Kit PRL Lactotrope/LTH/Luteotropic Hormone 0.469ng/ml 0.781-50ng/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0014 Bovine P21(Cyclin-dependent Kinase Inhibitor 1A) ELISA Kit P21 CDKN1A 46.9pg/ml 78-5000pg/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0015 Bovine SAA(Serum amyloid A protein) ELISA Kit SAA SAA(Serum Amyloid A) 1.875ng/ml 3.125-200ng/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0016 Bovine Pg(Progesterone) ELISA Kit Pg Pg(Progesterone) 0.188ng/ml 0.313-20ng/ml Competitive ELISA, Coated with Antigen 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0028 Bovine IL-6(Interleukin 6) ELISA Kit IL-6 IL6/BSF2/HGF/HSF/IFNB2/CDF 9.375pg/ml 15.625-1000pg/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0029 Bovine TRH(Thyrotropin-releasing Hormone) ELISA Kit TRH MGC125964/MGC125965 7.5pg/ml 12.5-800pg/ml Competitive ELISA, Coated with Antigen 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0030 Bovine KISS(Kisspeptin) ELISA Kit KISS / 18.75 pg/ml 31.25-2000pg/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0031 Bovine HSP60(Heat shock protein 60) ELISA Kit HSP60 0.938ng/ml 1.563-100ng/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0032 Bovine HSP70(Heat shock protein 70) ELISA Kit HSP70 0.188ng/ml 0.313-20ng/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0033 Bovine HSP90(Heat shock protein 90) ELISA Kit HSP90 3.75ng/ml 6.25-2280ng/ml Sandwich ELISA, Double Antibody 4 ℃ for 6 months 96T

Bovine EB0036 Bovine AP12(Apelin 12) ELISA Kit AP12 0.094ng/ml 0.156-10ng/ml Competitive ELISA, Coated with Antigen 4 ℃ for 6 months 96T