菌落总数的测试片

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2017-07-16 07:24:08
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产品简介

菌落总数的测试片

详细介绍

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:王晓蕾

lhcx

 

菌落总数的测试片检测方法
方法编号:5011
 
1 适用范围:可用于各类食品及原料中菌落总数的测定。也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。
2 方法原理将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑(TTC)显色剂等加载在试纸片,经加样、培养后,细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑,通过计数报告结果。
3 操作方法
3.1样品处理:无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,经充分振摇(均质)做成1:10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内,用1mL灭菌吸管反复吸吹制成1:100的稀释液。以此类推,做出1:1000等稀释度的稀释液,每个稀释度更换一支灭菌吸管。
3.2接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将测试片放在水平台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的纸片上,轻轻将上盖膜放下,静置5 min使培养基凝固,zui后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。
3.3 养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36±1℃,培养15~24h。
4 结果判断与计数:
4.1细菌在纸片上生长后会显示红色斑点,选择菌落数适中(10个~100个)的纸片进行计数,乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在100以内时,按实有数报告。大于100时,用二位有效数字,二位有效数字后面的数字,以四舍五入方法计算,并以10的指数来表示。
4.2计数原则与报告方式
4.2.1通常选择菌落在10个~100个之间的纸片进行计数,乘以稀释倍数报告之(见下表中例1)。国家标准菌落总数报告方式术语为cfu/g或mLcfu的含义为菌落形成单位。
4.2.2若有两个稀释度的菌落数在10个~100个之内,两者的比值小于2,则取其平均数,若大于2,则采用稀释度小者报告(见下表2和例3)。
4.2.3若三个稀释度的菌落数都有在10个~100个之内时,应选择二个低数值的平均数(见下表中例次4)。
4.2.4 若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时,应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数;或采用均小于数量标准的zui小值,或采用均大于数量标准的zui大值(见下表中例次5和例次6)。
例次
稀释度
两稀释
度之比
选定计数
稀释度
报告方式
(个/g或
/mL
10-1
10-2
10-3
1
2
3
4
5
6
158
208
265
98
8
295
76
68
82
50
5
174
5
12
50
15
1
106
1.8
6.1
10-2
10-2、10-3
10-2
10-1、10-2
10-1
10-3
7.6×103
9.4×103
8.2×103
3.0×103
8.0×10
1.1×105
 
5 表面取样方法:加1mL灭菌生理盐水在测试片上,静置至少1h使培养基凝固;提起上层膜,使中央滤纸部分贴到待测物表面,用手在外侧轻压;然后将上盖膜合上,置培养箱内培养。
6 注意事项:使用过的纸片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。
 
 
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