Life-iLab/李记生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
Bis-Tris 蛋白预制胶(精准浓度,塑胶板)
¥188Bis-Tris 蛋白预制胶(范围浓度,塑胶板)
¥188Tris-Glycine蛋白预制胶(精准浓度,塑胶板)
¥188Tris-Glycine蛋白预制胶(范围浓度,塑胶板)
¥188Hepes-Tris蛋白预制胶(精准浓度,塑胶板)
¥188Hepes-Tris 蛋白预制胶(范围浓度,塑胶板)
¥188三色预染蛋白Marker(10-250KD)
¥798RIPA裂解液(弱)
¥158RIPA裂解液(中)
¥158Tris-SDS电泳缓冲液 (粉剂)
¥78Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液 (粉剂)
¥188EZ ECL 化学发光液(普通型)
¥198产品描述
伴刀豆球蛋白A(ConA)磁珠是 粒径为200 nm 的纳米磁珠表面上共价结合了大量的伴刀豆球蛋白A(ConA)纳米级磁珠提供的超大比表面积,具有更多的结合位点,磁珠使用量更少,非特异性吸附率低。用于分离细胞或从血清和细胞提取物中分离糖蛋白,并可以借助磁力架等磁分离设备非常便捷地应用于分离糖蛋白,CUT&RUN CUT&Tag 等相关实验。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠 | AP62L222 | 1 mL |
运输与保存
蓝冰运输。4℃保存,有效期12个月。注:避免冻融或离心磁珠。
技术参数
基质 | 硅基磁珠 |
配体 | 伴刀豆球蛋白A(ConA) |
粒径 | 200nm |
磁珠浓度 | 10mg/mL |
结合能力 | ≥0.9mg 糖蛋白/mL磁珠 |
适用范围 | 分离糖蛋白,CUT&RUN,CUT&Tag |
使用方法
自备试剂
缓冲液 | 配方 |
结合缓冲液 | 1×PBS, 1mM MgCl2, 1mM MnCl2, 1mM CaCl2 (pH7.4) |
洗涤缓冲液 | 1×PBS, 1mM MgCl2, 1mM MnCl2, 1mM CaCl2 (pH7.4), 0.1% Tween 20 |
洗脱缓冲液 | 5mM Tris(pH 8.0), 0.15M NaCl, 0.05% SDS,1M Glucose |
1.样本处理
(1) 准备哺乳动物细胞(1.0×104~1.0×105个),离心收集(4℃,600×g,3-5min),小心吸弃上清;
(2) 加入 500 μL 结合缓冲液,充分混匀重悬细胞,离心收集(4℃,600×g,3-5min),小心吸弃上清;
(3) 加入 200-500 μL结合缓冲液,同时加入蛋白酶抑制剂,充分混匀,重悬细胞。
2.磁珠预处理
(4) 用移液器轻柔吹打伴刀豆球蛋白A磁珠 ,使其充分混匀,取10 µL磁珠悬液(可酌情调整磁珠用量)置于新的 1.5 mL离心管中,接着在磁力架上静置 1 min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,吸弃上清;
(5) 加入 500μL 结合缓冲液 ,用移液器轻柔吹打重悬磁珠,接着在磁力架上静置 1 min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,吸弃上清;
(6) 重复上个步骤(5)一次,注:面对多个样品时,可先将总共所需的磁珠预处理后再分装到各个反应管中。
3.样品的结合
(7) 在预处理后的磁珠中加入步骤3处理后的细胞样本混合,置于旋转混合仪上孵育(常温30min),接着在磁力架上静置 1min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,小心吸弃上清,离心管中剩余的即为蛋白-磁珠复合物;
4.洗涤
(8) 在步骤(7)得到的蛋白-磁珠复合物中加入500 μL洗涤缓冲液,用移液器轻柔吹打磁珠,并置于旋转混匀仪上孵育5min,接着在磁力架上静置1min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,吸弃上清。再重复此步骤两次;
5.蛋白洗脱
(9) 在步骤(8)得到的蛋白-磁珠复合物中加入50~250 μL洗脱缓冲液,置于翻转混合仪上孵育(常温10-30 min),接着在磁力架上静置 1 min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,收集上清,即为目的蛋白。收集上清,即为目的蛋白。若洗脱效果不佳,可重复洗脱一次,或者增加孵育时间。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 请勿高速离心、干燥或冷冻磁珠,这些操作会导致磁珠聚集而降低结合能力。
3. 避免使用含有 EDTA 或其它金属螯合剂的试剂,否则会降低磁珠与蛋白的结合效率 。
4. 磁珠使用前应充分振荡均匀。磁珠应保存在储存溶液中,防止干燥。
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本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。