压缩空气微生物检测

目的：通过压缩空气检测微生物状况，确认压缩空气质量，保证无菌过滤产品没有被微生物污染。

范围：适用于无菌过滤用气点压缩空气浮游菌测试。

责任：参与测试的所有人员对实施本规程负责

QA 质量员负责具体测试工作；无菌过滤操作人员负责对采样管和采样头的清洁和消毒灭菌；

QC 检验员负责测试培养皿的准备和采样后的培养观察。

测试依据:

中华人民共和国国家标准《医药工业洁净室(区)浮游菌测试方法》（GB/T16293-1996）

测试原理

压缩空气的微生物测试采用浮游菌测试法。其原理为通过收集悬浮在压缩空气中的生物粒子于专门的培养基，经若干时间，在适宜的生长条件下让其繁殖到可见菌落（ CFU）进行记数，从而判定单位压缩空气中的活微生物数，来评判空气的无菌状况。

仪器和试剂：JCQ-1 型浮游菌采样器，ф 90×15mm 培养皿（普通肉汤琼脂培养基），恒温培养箱。

器具准备

1.培养基平皿的制备用ф 90×15mm 培养皿进行制备，每皿中加培养基约 20ml。

2.采样管清洗灭菌 每次采样结束，在万级洗涤间将采样管用纯化水冲洗 3 次，晾干， 然后将采样管两头开口用铝箔封住，使用前在万级灭菌间用蒸汽灭菌锅 132℃灭菌 10 分钟。

3.采样仪表面清洁  用消毒剂（0.1%新洁而灭或 75%酒精）对浮游菌采样仪表面和取样器外罩等擦拭消毒后置于万级洁净区域。 

样品采集

1.器皿消毒

2.在无菌过滤用气点用消毒剂（0.1%新洁而灭或 75%酒精）擦拭采样器的外表面和外罩及压缩空气接头。

3.打开采样器外罩，用消毒剂消毒采样器的顶盖，转盘以及外罩的内表面，盖上采样器外罩，压紧压板使外罩密封。

测试程序

1.抽气调流量

2.小心按上取样管，将采样管与待测试的压缩空气管阀门连接。打开电源，开动真空泵， 真空泵 15 秒后自动抽气,调节压缩空气进气阀，控制进气流量 50L/min，设置采样时间为 5 分钟（转盘 5  分钟转一圈）， 抽走残留消毒剂，5 分钟后真空泵自动关闭。关闭压缩空气空气进气阀。

3.打开采样器外罩，将ф 150×15mm 普通肉汤琼脂培养基置于采样器内，盖上外罩，压紧压板使外罩密封，调节刻度盘，旋转调节钮使采样器狭缝与培养基保持约 2mm 距离。

4.按设置按钮，设置采样时间为 20 分钟（转盘 20 分钟转一圈），按启动键， 真空泵 15 秒后开始抽气，调节压缩空气进气阀，进气量控制在 50L/min，对压缩空气进行采样。采样时间到，真空泵自动关闭。

5.采样结束后，关闭压缩空气进气阀，关闭采样仪电源，打开外罩，取出培养皿，盖上皿盖倒置。用 0.1％新洁而灭或 75%酒精轻轻擦洗外罩的内壁和转盘，盖上外罩。每次测试采样一次。

样品的培养

将采集的培养基平皿样品置于恒温箱 35℃恒温培养 48 小时（须安排空白对照）。

菌落记数

培养结束后用肉眼直接记数，然后用 10 倍放大镜检查是否有遗漏。若平板上有 2 个或 2个以上的菌落重叠但可分辨时以 2 个或 2 个以上菌落记数。

结果判定 

无菌压缩空气浮游菌是否合格的判断标准等同于 100 级洁净区的标准。因此无菌压缩空气的浮游菌浓度≤5CFU/m3 为合格标准。

若测得的压缩空气浮游菌浓度超过合格标准,则必须对此空气系统先消毒，然后重新采样两次，两次测试结果必须合格才能说明测试结果合格。

测试结束填写《压缩空气浮游菌测试报告》。 

采样周期

无菌过滤点压缩空气浮游菌检测周期为每月测试一次