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DNA的固相合成。
即DNA3'端固定于基质上,然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于应用DNA聚合酶的DNA合成。
合成过程
第··yi ···个碱基的3‘末端固定在树脂上,下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护,碱基上的氨基用苯甲酸保护,然后对3‘-OH用氨基磷酸化合物进行活化。
1。1个碱基的5’-OH和下个碱基的3‘-OH形成亚磷酸三酯,
2。然后用碘氧化成磷酸三酯
3。加入二----lu--乙---酸---除去第二个碱基5’-OH上的保护剂DMT
循环进行加入下一个碱基
合成完毕后
1。用苯硫酚除去5’-OH上的保护剂DMT
2。用浓氢氧化铵将片段与固体树脂断开,洗脱
3。用浓氢氧化铵在加热的条件下除去碱基上的保护剂
4。除去氢氧化铵,真空抽干
5。液相色谱或者PAGE,回收片段长的。
进口DNA 合成仪设计用于合成结构上类似DNA或RNA的寡核苷酸的自动化仪器。一般应用于固相合成法,每次将一个核苷酸加到所接长的寡核苷酸链上,加入每一个核苷酸都利用相同的化学反应与相应的嘌呤或嘧啶碱基衍生物作用。所用化学反应和操作细节随不同的仪器而改变,广泛应用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
OLIGOMAKER 工业级进口DNA 合成仪专为合成较少寡核苷酸序列的客户为设计,48柱机型共有48个合成柱,可在2.5小时内一次性合成48条产物(20mer),可配置6,8,10,15个碱基瓶位,可适配1L, 2.5L或更大的试剂瓶, 合成范围为10nmol—1umol。除常规合成外,还可进行修饰,荧光标记,硫代等多种特殊合成,满足客户不同需求。同时,OLIGOMAKER 48 工业级DNA RNA核酸合成仪还支持快速合成,可在2小时之内快速合成10条产物(20mer)。
DNA RNA核酸合成仪技术参数:
(1) 合成柱数:具有 48个合成柱,可同时合成48种相同或不同、相同长度或不同长度低聚核苷酸。
(2) 合成速度:2.5小时内可合成48个产物(20mer),2小时内可合成10个产物(20mer)
(3) 碱基瓶位:6个碱基瓶位,可升级至8个,10个,多可支持15个碱基瓶位。
(4) 试剂瓶位:支持1,2.5L试剂瓶。
(5) 溶剂消耗:合成过程中无需反复冲洗试剂管道,每个循环溶剂消耗量少于1ml。
(6) 合成柱种类:支持预装填柱及自装填柱。
(7) 合成柱承载方式:盘式。
(8) 合成产物种类:可 DNA, RNA, LNA, 硫代,修饰,荧光标记等。