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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
产品名称 | 规格 | 货号 |
1×10⁶cells/T25培养瓶 | GOY-01X0032 |
名称 BEL-7404 (肝癌细胞)
别称 Bel-7404; BEL 7404; Bel 7404; BEL7404; Bel7404; 7404
年龄(性别) 男
组织来源 肝癌
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
背景描述 用Northern Blot方法,未能检测到BEL-7404细胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表达。
生物安全等级 1
生长培养基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推荐换液频率 2~3次/周
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
1号染色体开放阅读框67抗体
1号染色体开放阅读框83抗体
CD33抗体
富含半分泌蛋白3抗体
细胞骨架相关蛋白4抗体
大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠乳腺癌标志物-CA153elisa检测试剂盒
大鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)elisa检测试剂盒
大鼠肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT1)elisa检测试剂盒
大鼠肉碱elisa检测试剂盒免费代测
BEL-7404 (肝癌细胞)Leibovitz’s L-15培养基 500ml
L-Glutamine 100ml
Lowry 蛋白定量试剂盒1000T
Lowry 蛋白定量试剂盒250T
L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒
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