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产品描述:
考马斯亮蓝染色试剂盒(Commassie Blue StainingKit)采用了经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法,以考马斯亮蓝R250为染料,可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
组分:
编号 | 名称 | 规格 |
A | 考马斯亮蓝染色液 | 100ml |
B | 考马斯亮蓝染色脱色液 | 500ml |
1、常规染色脱色方法:
(1)电泳结束后,取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,确保染色液可以充分覆盖凝胶。
(2)置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温染色 1h 或更长时间。
注:具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚,温度较低,则染色时间 宜适当延长。凝胶较薄,温度较高,则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染 色液的颜色非常接近,在染色液中几乎看不清凝胶时,可以认为已染色充分。
(3)倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少 2-3 次。
(4)加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶。
(5)置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温脱色 4-24h。期间更换脱色液 2-4 次,直至蓝色背景基本上全部被脱去,并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色 1-2h 后即可出现。
注:脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。
(6)完成脱色后,可把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶 涨。如需避免溶涨,可以把胶保存在含 20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。
2、快速染色脱色方法:
(1)电泳结束后,取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾, 立即停止加热。通常大于 10%的胶比较坚韧,在煮沸时不易破损;对于小于 10%的胶,宜 尽量避免煮沸,以免出现胶碎裂的情况。
(2)随后在染色液温度较高的情况下,在室温摇床上摇动 5-10min。
(3)倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少 2-3 次。
(4)加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保染色液可以充分覆盖凝胶。
(5)微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。
(6)随后在脱色液温度较高的情况下,在摇床上摇动 5-10min。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白条带。
(7)更换新鲜的脱色液,重复步骤 5 和步骤 6,直至蓝色背景基本上全部被脱去,蛋白条带染色效果达到预期。
(8)完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨,可以把胶保存在含 20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。
注意事项:
为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。