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产品描述:
细胞内蛋白的磷酸化和去磷酸化是信号转导、细胞增殖、分化和凋亡等重要生理活动的调控开关,这两种作用主要通过蛋白激酶和磷酸酶的相互协调来实现。体外研究中,由于组织或者细胞经裂解会释放出大量的酶原,这些酶原会被激活从而开始消化随之释放的待研究蛋白,不仅影响对蛋白真实水平的了解,甚至由于某些蛋白含量很低,再经进一步降解,无法检测到,干扰对调控机制的正确研究。为此,体外研究,最大限度还原蛋白在细胞内的原始状态极其重要,可通过蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的组合使用来达此目的。
本品是多种磷酸酶抑制剂的特殊混合物,包含氟化钠,正钒酸钠,咪唑,钼酸钠,酒石酸钠,焦磷酸钠,β-磷酸甘油等成分,广谱抑制非特异性的酸性和碱性磷酸酶。本品以100×储存液的形式提供,可用来保护来源于原代细胞、哺乳动物细胞、动植物、细菌、酵母等组织或细胞等裂解物中的多种磷酸化蛋白维持本来状态,适用于蛋白纯化,蛋白免疫印迹(Western Blot),免疫(共)沉淀(IP/Co-IP),蛋白下拉(Pull-down assay),免疫荧光(IF),免疫组化(IHC),以及激酶研究等多种实验。
使用方法:
1、使用前室温平衡直至溶解,低速震荡以保证各成分均匀。
2、按照1:100 的比例(体积比)加入样品溶液(比如细胞或组织裂解液)中即可。或者根据实验目的,以及所研究的特定细胞和组织,通过实验进行使用比例的摸索和优化。
注意事项:DTT、EDTA和EGTA对正钒酸钠活性的发挥会有影响。
注意事项:
1、DTT、EDTA和EGTA对正钒酸钠活性的发挥会有影响。
2、本品具广谱磷酸酶抑制活性,不具有蛋白酶抑制活性。可配合广谱型蛋白酶抑制剂混合物(100×储液)(货号:abs9161)一起使用以实现蛋白的全面保护。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。