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产品介绍:
Elite Fect-I小核酸活体组织转染试剂专门用于活体动物组织和脏器的小核酸介入转染。Elite Fect-I可用来转染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以内的小分子RNA和DNA,目标转染脏器可以是肝脏、肺脏、(肾脏、乳腺、胰腺、脾脏)等脏器,也可以是转移瘤、肌肉、(骨髓)等组织。Elite Fect-I使用简便,只需将siRNA与Elite Fect-I充分混合,再局部注射入靶脏器或靶组织即可。Elite Fect-I不仅可以转染活体小鼠,还可以转染活体大鼠和兔子等。
产品特点:
1、较好的活体动物脏器和组织转染效率:以Elite Fect-I包裹ApoB siRNA,可抑制小鼠肝脏80%以上的ApoB mRNA表达;以Elite Fect-I包裹c-myc siRNA,可抑制裸鼠种植瘤90%以上的c-myc mRNA表达;
2、性能稳定,转染结果具有高度的可重复性;
3、使用简单,只需将siRNA与Elite Fect-I充分混合,再局部注射入靶脏器或靶组织即,不需特殊设备;
4、适用于体内基因功能的验证和siRNA药物的筛选;
5、3只转染(包裹0.12mg sRNA)、6只转染(包裹0.24mg sRNA),每只小鼠的重量20g。
操作步骤:
A. 计算siRNA需要的剂量,一般1cm3大小的组织、脏器或肿块,需要1.2ug siRNA,此siRNA应高纯脱盐,适当修饰,适于动物体内实验使用;
B. 计算Elite Fect-I转染试剂需要的剂量,一般1.2ug siRNA,需要20ul Elite Fect-I转染试剂包裹;
C. siRNA-混合物准备:
1. 1.2ug siRNA 溶解于50μl注射用生理盐水。
2. 20μl Elite Fect-I用30μl生理盐水稀释,轻轻混匀,室温放置5分钟。
3. 放置5min后,尽快(10分钟内)将siRNA 溶液转移至转染试剂中,轻轻混匀,室温孵育20 min。
D. 用已灭菌的微量注射器或其它适当器具将siRNA-混合物注射入目标组织或脏器;
E. 48小时后,取局部组织,RT-qPCR检测。
储存/保存方法:
短期4°C 保存,超一个月-20°C 储存,避免反复冻融,有效期1年。
技术指标:
转染实验优化:
1、为了提高转染效率,建议对转染条件进行优化,特别是刚开始使用。一般1cm3大小的组织,需要1.2ug 即90pmol siRNA ,但如果是血流较快的组织或大鼠、兔子等较大的动物,siRNA用量需适当增加,研究者可以配制不同的用量进行摸索;
2、转染试剂的用量应根据 siRNA的用量进行改变,其搭配比例可在siRNA用量(pmol):转染试剂(ul)在(1.5-3):1的范围内进行优化。
产品用途:
Elite Fect-I可用来转染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以内的小分子RNA和DNA,目标转染脏器可以是肝脏、肺脏、(肾脏、乳腺、胰腺、脾脏)等脏器,也可以是转移瘤、肌肉、(骨髓)等组织,Elite Fect-I不仅可以转染活体小鼠,还可以转染活体大鼠和兔子等。
注意事项:
本产品经严格的质量检验证明,无生物污染,注意: 本产品仅用于科研实验。
*温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究