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生产厂家厂商性质
上海市所在地
描述:
本试剂盒采用磁珠捕获法提取外泌体,试剂盒中的功能性修饰的磁珠可以特性的捕获总的外泌体 (EVs);它能从尿液、唾液等体液样本或细胞上清中提取完整的外泌体,无需超速离心,可同时操作多个样本,方便高效。
产品特点:
兼容性广:可满足多种不同类型的样本,如尿液、细胞上清、唾液、脑脊液等。
操作简便: 无需超离,仅需2h。
性价比高: 多种样本,一盒搞定。
产品原理:
产品组分:
名称 | 规格 | 储存 |
EVtrap magnetic | 1mL | 2-8℃ |
Incubation buffer I | 5mL | 常温 |
Incubation buffer II | 50mL | 常温 |
Washing Buffer | 50mL | 2-8℃ |
Elution Buffer | 20mL | 常温 |
使用方法:
注:该试剂盒适用于多种样本,如尿液、细胞上清、唾液及脑脊液等,具体使用比例见下表:
样本类型 | 样本体积 | EVtrap magnetic使用量 |
尿液 | 1mL | 20 μL |
细胞上清 | 1mL | 5 μL |
唾液 | 1mL | 50 μL |
脑脊液 | 1mL | 50 μL |
以尿液样本为例,操作流程如下:
取晨尿(中段尿),2500g离心10min以去除细胞碎片,收集上清,重复1次,将处理好的尿液放置在-80℃储存备用。
外泌体的分离纯化
1、向10mL的尿液中加入1mLIncubation Solution I上下混匀(若尿液储存在-80 ℃,可以在37℃的水浴中解冻后使用)。
2、加入200μL的 EVtrap magnetic 室温下孵育0.5-1h, 磁吸去上清。
3、加入10mL Incubation Solution Ⅱ 上下颠倒混匀20-30次,磁吸去上清。
4、加 入5mL Washing Buffer上下颠倒混匀20-30次,磁吸去上清,洗1次。
5、加 入1mL Washing Buffer上下颠倒混匀20-30次,转移至1.5 mL 离心管,磁吸去上清。
6、加入200μL的Elution Buffer, 涡旋10min。
7、磁吸收集洗脱液,重复步骤6,将两次洗脱液共400 μL 合并到一个离心管中,涡旋混匀后再瞬离。
8、冻干洗脱液,将冻干后样品置于-80 ℃长期保存,或用于下游检测实验。
注意事项:
1、将 EVtrap magnetic 储存在4℃,孵育液和洗涤液等储存在室温。
2、磁吸时请使用高磁磁力架(#abs7980或#abs7982或#abs7983),以保证磁珠的外泌体捕获效果。
3、在任何洗涤步骤中不要剧烈涡旋。将样品上下颠倒20-30次使磁吸后的磁珠结团分散即可。
4、孵育后的操作步骤中,在进行上下颠倒混匀时,动作要轻柔,以避免与 EVtrap magnetic 捕获的外泌体脱落。
实验结果图: